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【医技】检验科医疗诊疗规范——第一篇 临床化学与免疫检验21-30

作者:王泓 日期:2014-06-19

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    【临床意义】
    1.升高可见于甲状旁腺功能亢进症、结节病、范可尼综合征、代谢性碱中毒、糖尿病等。
    2.降低可见于甲状旁腺功能减退症、吸收不良、慢性肾衰竭、肾炎伴酸中毒等。
    【标本要求】
    1.尿液 不添加防腐剂的计时尿或随机尿，留完后量取总尿量，充分混匀后取3~5ml送检。
    2.尿液标本2~8℃保存可稳定4天，15~25℃保存可稳定2天。
    3.混浊的尿样本应3000转离心10分钟后取上清检测。
    【方法与原理】
    1.方法 磷钼酸比色法、终点法。
    2.原理 酸性条件下钼酸铵与血清中无机磷反应，形成非还原性磷钼酸化合物，在340nm波长下，吸光度的增加与血清中无机磷含量成正比。
    7H3PO4+12（MO7O24）6-+72H+→7H3PO4（MoO3）12+36H2O
    【仪器】
    Beckman Coulter AU系列全自动生化分析仪。
    【试剂】
    1.试剂厂商 Beckman Coulter。
    2.试剂 0.35mmol/L钼酸铵、50mmol/L氨基乙酸、防腐剂、200mmol/L硫酸。
    3.试剂稳定性 未开盖试剂2~8℃保存至试剂盒标示有效期，开盖后试剂在仪器上的稳定期是30天。
    4.质控品 Bio-Rad公司Liquichek尿液化学质控品，397及398两个水平。
    5.校准品 Beckman Coulter公司尿液多项校准液（货号：ODC0025），靶值参见不同批号说明书。
    【参数设置】
    1.Sample vol：1.7μl   Dil vol：0μl   Pre-Dilution Rate：10
    2.Reagent 1 vol：25μl Dil vol：100μl
    3.Reagent 2 vol：25μl Dil vol：100μl
    4.Length：Pri：340nm Sec：380nm
    5.Read Point Fst：27 Lst：10
    6.Method：end Reaction：（+）
    7.Reagent OD Limit：First L-0.1 First H 0.1Last L-0.1 Last H 0.5
    8.Dynamic range：0~113
    9.Cal type：AB
    10.Correlation factor：See updated information on parameters
    【项目校准】
    1.定期校准：每月。
    2.更换试剂批号后，应校准。
    3.维护保养后如更换光源、清洗比色杯、清洁光路及仪器后光电校正、更换管路等应校准。
    4.质控失控后，在进行其他相应处理后，质控结果仍不满意的，应重新校准。
    5.特殊情况校准要求参见仪器操作维护手册。
    【性能参数】
    1.精密度

质控
批内
总
浓度（mmol/L）
SD（mmol/L）
CV%
SD（mmol/L）
CV%
UN1557
1.43
0.02
1.13
0.02
1.51
UE1558
2.28
0.02
0.99
0.03
1.03

    2.检测范围 尿样本为0~113mmol/L。若样品中U-P浓度大于113mmol/L，可用生理盐水稀释2倍后重新测定，结果乘以稀释倍数。
    【参考范围】
    本实验室：24小时尿磷排泄率9.7~42.Ommol/24h（30.1~130.2mg/24h）。
    计算公式：24小时尿磷排泄率一尿磷浓度（mmol/L）×24小时尿量（L）/24小时。
    单位转换：mg/dl×0.323=mmol/L
    【临床意义】
    胱抑素C（Cys C）是一种小分子量的胱氨酸蛋白酶抑制剂。所有有核细胞都能稳定地产生Cys C，存在于人体的体液中。Cys C几乎完全被肾小球滤过，由近端肾小管重吸收并被代谢。无肾小管分泌和排泄。Cys C不受炎症反应、性别、肌肉以及年龄变化的影响。Cys C可用于单独或与肌酐联合评估肾小球滤过率（GFR），帮助早期识别糖尿病肾损害、孕期肾损，也可用于肾移植术后评估。Cys C升高见于各种原因引起的肾脏损害。
    【标本要求】
    1.空腹采静脉血3.0ml（血清或肝素抗凝血浆）。
    2.血浆/血清常温稳定6天，2~8℃稳定12天，-80℃稳定14个月。
    【方法与原理】
    1.方法 胶乳增强免疫透射比浊法（PETIA）、固定时间反应。
    2.原理 样本中的Cys C与超敏化的抗Cys C抗体胶乳颗粒试剂反应形成免疫复合物，在570nm波长处检测吸光度，其变化程度与样本中的Cys C含量成正比。
    【仪器】
    Beckman Coulter AU系列全自动生化分析仪。
    【试剂】
    1.试剂厂商 美国G.cell公司。
    2.试剂1 Tris缓冲液。
    3.试剂2 抗人Cys C多克隆抗体胶乳颗粒悬浊液。
    4.试剂稳定性 2~8℃避光保存稳定至12个月，开封后仪器（2~8℃）稳定28天。
    5.质控品 配套控制品，生理和病理两水平。
    6.校准品 配套校准液，靶值参见不同批号说明书。
    【参数设置】
    1.Sample vol：3.0μl Dil vol：0μl Pre-Dilution Rate：1
    2.Reagent 1 vol：180μl Dil vol：0μl
    3.Reagent 2 vol：60μl Dil vol：0μl
    4.Wavelength Pri：570nm Sec：800
    5.Point Fst：13 Lst：27
    6.Method：Fixed Reaction：（+）
    7.Reagent OD Limit：First L-2   First 2.5 Last L-2   Last H 2.5
    8.Dynamic range：0~8
    9.Cal type：4AB
    10.Correlation factor：See updated information on parameters
    【项目校准】
    1.更换试剂批号后，应校准。
    2.维护保养后如更换光源、清洗比色杯、清洁光路及仪器后光电校正、更换管路等应校准。
    3.质控失控后，在进行其他相应处理后，质控结果仍不满意的，应重新校准。
    4.特殊情况校准要求参见仪器操作维护手册。
    【性能参数】
    1.精密度 批内CV≤1.41%；批间CV≤2.10%。
    2.检测范围 血清和血浆样本为0.1~8.Omg/L，当样本浓度超过检测范围上限时，可用0.9%生理盐水稀释3~5倍后重新测定，结果乘以稀释倍数。
    3.干扰 以下几种情况对该试验无显著干扰
    胆红素    ＜18.2mg/dl
    血红蛋白 ＜460mg/dl
    抗坏血酸 ＜50mg/dl
    甘油三酯 ＜2400乳糜度
    类风湿因子＜450IU/ml
    【参考范围】
    本实验室：≤1.03mg/L。
    【临床意义】
    1.ALP升高
    （1）生理性：正在生长发育中的儿童；妊娠期间，从妊娠第四个月开始因胎盘ALP增加而呈生理性升高。
    （2）病理性
    1）肝胆疾病：阻塞性黄疸、急性或慢性黄疸性肝炎、肝硬化、肝坏死、肝癌等。
    2）骨骼疾病：骨折恢复期、骨髓炎、佝偻病、纤维性骨炎、成骨不全症、骨转移癌等。
    2.ALP降低 偶见于甲状腺功能低下、恶性贫血等，临床意义不大。先天性ALP缺乏或减少症临床罕见，可引起骨中矿物质严重缺乏，并易发骨折。
    【标本要求】
    1.空腹采静脉血2.5ml（血清或肝素锂抗凝血浆），应避免溶血。
    2.血浆/血清常温稳定2小时，2~8℃稳定7天，-20℃至少稳定2个月，-80℃稳定更长时间。
    3.应该避免在过度的肌肉运动后采血。
    【方法与原理】
    1.方法 IFCC推荐的酶法、速率法。
    2.原理
   
    注：p-NPP：p-硝基苯磷酸盐；AMP：2-氨基-2-甲基-1-丙醇；pNP：p-硝基苯
    上述酶促反应中pNP在410/480nm吸光度的增加与样本中ALP的活性成正比。
    【仪器】
    Beckman Coulter AU系列自动生化分析仪。
    【试剂】
    1.试剂厂商 Beckman Coulter。
    2.试剂1 AMP缓冲液（pH10.40），氯化镁。
    3.试剂2 AMP缓冲液（pH8.85），磷酸对硝基苯，氯化镁。
    4.试剂稳定性 未开盖试剂2~8℃保存至试剂盒标示有效期，开盖后试剂在仪器冷藏位上稳定14天。
    5.质控品 Bio-Rad公司Liquichek人血清不定值临床化学控制品，691及692两个水平。
    6.校准品 Beckman Coulter公司多项校准液（66300），靶值参见不同批号说明书。
    【参数设置】
    1.Sample vol：1.8μl Dil vol：10μl Pre-Dilution Rate：1
    2.Reagent 1 vol：36μl Dilvol：36μl
    3.Reagent 2 vol：36μl Dil vol：26μl
    4.Wavelength Pri：410nm Sec：480nm
    5.Point Fst：16 Lst：27
    6.Method：rate Reaction：（+）
    7.Linearity：15%
    8.Lag Time：No
    9.Min OD：-0.1 Max OD：2.5
    10.Reagent OD Limit：First L-0.1 First H 1.2  Last L-0.1 Last H 1.2
    11.Dynamic range：5~1500
    12.Cal type：AB
    13.Correlation factor：See updated information on parameters
    【项目校准】
    1.更换试剂批号后，应校准。
    2.维护保养后如更换光源、清洗比色杯、清洁光路及仪器后光电校正、更换管路等应校准。
    3.质控失控后，在进行其他相应处理后，质控结果仍不满意的，应重新校准。
    4.特殊情况校准要求参见仪器操作维护手册。
    【性能参数】
    1.精密度

质控
批内
总
浓度（U/L）
SD（U/L）
CV%
SD（U/L）
CV%
UN1557
229
2.52
1.10
4.47
1.94
UE1558
406
4.22
1.04
4.43
1.09

    2.检测范围 血清和血浆样本为5~1500U/L，当样本浓度超过检测范围上限时，可用0.9%生理盐水稀释2~20倍后重新测定，结果乘以稀释倍数。
   3.干扰 以下几种情况对检测值无显著干扰（＜10%）
    胆红素    ≤479μmol/L
    血红蛋白 ≤4.5g/L
    甘油三酯 ≤11.3mmol/L（高脂样本超过反应允许吸光度时，结果将标记@，
    这时应15 000转高速离心15分钟后，取下层清亮液体测定。）
    【参考范围】
    本实验室：42~390U/L（≤15岁）。
    52~171U/L（16~18岁）。
    30~120U/L（≥19岁）。
    【临床意义】
    1.总蛋白降低
    （1）合成障碍抗体缺陷综合征（AbDS）。
    （2）严重肝损害，如病毒性肝炎爆发期和毒物损伤，肝硬化和急、慢性肝炎总蛋白一般正常。
    （3）长期营养不良、绝食、精神性厌食、胃肠道肿瘤等导致的蛋白摄入不足。
    （4）另外，热带性和非热带性口炎性腹泻、食物过敏、双糖酶缺乏症、胰纤维性囊肿、选择性IgA缺乏症等引起的吸收障碍也是低蛋白的原因。
    （5）蛋白质丢失，如肾病综合征等肾丢失，渗出性肠病、克罗恩病、巨皱襞性胃炎、结肠息肉等肠道丢失，烧伤、渗出性湿疹和大疱性皮肤病等皮肤丢失；另外，腹水、胸水也有蛋白丢失。
    （6）其他，如妊娠、烦渴、出血性贫血、慢性溶血等。
    2.总蛋白升高
    （1）浆细胞瘤、Waldenstrom巨球蛋白血症。
    （2）慢性炎症，如自身免疫性肝炎、活动性结节病、某些类型的肺结核、脓毒血症、梅毒、麻风、疟疾、血吸虫、黑热病等。
    （3）脱水引起的假性高蛋白血症，如腹泻、呕吐、摄水量不足、出汗、尿崩症、急性肾衰竭多尿期等。
    【方法与原理】
    1.方法 双缩脲法。
    2.原理 铜离子在碱性溶液中能与蛋白质和至少包含两个肽的多肽作用产生蓝紫色络合物。该蓝紫色络合物在540nm处吸光度的增加与样品中蛋白质的浓度成正比。
    【标本要求】
    1.空腹采静脉血3ml（血清或肝素锂抗凝血浆），应避免溶血；胸、腹水及引流液标本不少于1ml，要求标本离心后清亮，无黏稠物。
    2.血浆/血清常温稳定6天，2~8℃稳定4周。
    【仪器】
    Beckman Coulter AU系列自动生化分析仪。
    【试剂】
    1.试剂厂商 Beckman Coulter。
    2.试剂 200mmol/L氢氧化钠，32mmol/L酒石酸钾钠，18.8mmol/L硫酸铜，30mmol/L碘化钾。
    3.试剂稳定性 未开盖试剂2~25℃保存至试剂盒标示有效期，开盖后2~8℃可稳定30天。
    4.质控品 Bio-Rad公司Liquichek人血清不定值临床化学控制品，691及692两个水平。
    5.校准品 Beckman Coulter公司多项校准液（66300），靶值参见不同批号说明书。
    【参数设置】
    1.Sample vol：5μl   Dil vol：0μl Pre-Dilution Rate：1
    2.Reagent 1 vol：33μl Dil vol：90μl
    3.Reagent 2 vol：33μl Dil vol：10μl
    4.Wavelength Pri：540nm Sec：660nm
    5.Pointl Fst：0 Lst：27 Point2 Fst：0 Lst：10
    6.Method：end Reaction：（+）
    7.Reagent OD Limit：First 1-0.5 First H 0.1 Last l-0.5 Last H 0.1
    8.Dynamic range：30~120
    9.Cal type：AB
    10.Correlation factor：See updated information on parameters
    【项目校准】
    1.更换试剂批号后，应校准。
    2.维护保养后如更换光源、清洗比色杯、清洁光路及仪器后光电校正、更换管路等应校准。
    3.质控失控后，在进行其他相应处理后，质控结果仍不满意的，应重新校准。
    4.特殊情况校准要求参见仪器操作维护手册。
    【性能参数】
    1.精密度

质控
批内
总
浓度（g/L）
SD（g/L）
CV%
SD（g/L）
CV%
UN1557
59
0.9
1.52
0.9
1.49
UE1558
48
0.6
11 28
0.7
1.46

    2.检测范围30~120g/L，当样本浓度超过检测范围上限时，可用0.9%生理盐水稀释3~5倍后重新测定，结果乘以稀释倍数。
    3.干扰 以下几种情况对检测值无显著干扰（＜10%）
    胆红素    ≤410μmol/L
    血红蛋白 ≤3g/L
    甘油三酯 ≤11.3mmol/L（高脂样本超过反应允许吸光度时，结果将标记@，
    这时应15 000转高速离心15分钟后，取下层清亮液体测定。）
    【参考范围】
    本实验室（血清/血浆）：60~85glL。
    儿童：1~30天：41~63g/L。
    1~12个月：44~79g/L。
    1~18岁：57~80g/L。
    【临床意义】
    1.白蛋白降低
    （1）生理状况可见于妊娠。
    （2）白蛋白摄入、合成降低，如肝硬化、肝功能异常、营养不良及吸收障碍等。
    （3）白蛋白丢失，如肾病综合征、烧伤、渗出性肠病、水肿、腹水等。
    （4）也见于消耗性疾病，如恶性肿瘤和重症结核等。
    2.白蛋白升高 临床不会发生白蛋白浓度绝对升高，但可见干化症等假性升高。
    【标本要求】
    1.空腹采静脉血3.0ml（血清或肝素锂抗凝血浆）。
    2.全血室温稳定1~2小时，血浆/血清常温稳定8小时，2~8℃稳定2天，-20℃至少稳定3个月，-80℃稳定3个月以上。
    3.应该避免标本溶血。
    检测系统l：Beckman Coulter AU
    【方法与原理】
    1.方法 溴甲酚绿法、终点法。
    2.原理 在pH4.2时，白蛋白和溴甲酚绿染料结合产生蓝绿色复合物，在630nm吸光度增加与白蛋白浓度成正.比。
   
    【仪器】
    Beckman Coulter AU系列生化分析仪。
    【试剂】
    1.试剂厂商 Beckman Coulter。
    2.试剂 100mmol/L琥珀酸缓冲液（pH4.2），0.2mmol/L溴甲酚绿。
    3.试剂稳定性 未开盖试剂2~25℃保存至试剂盒标示有效期，开盖后2~8℃可稳定30天。
    4.质控品 Bio-Rad公司Liquichek人血清不定值临床化学控制品，691及692两个水平。
    5.校准品 Beckman Coulter公司多项校准液（66300），靶值参见不同批号说明书。
    【参数设置】
    1.Sample vol：1.6μl   Dil vol：0μl   Pre-Dilution Rate：1
    2.Reagent 1 vol：46μl Dil vol：194μl
    3.Reagent 2 vol：0μl   Dil vol：0μl
    4.Wavelength Pri：600nm Sec：800nm
    5.Pointl Fst：0 Lst：1
    6.Method：end Reaction：（+）
    7.Reagent OD Limit First L-0.1   First H 0.5   Last L-0.1   Last H 0.5
    8.Dynamic range：15~60
    9.Cal type：AB
    10.Correlation factor：See updated information on parameters
    【项目校准】
    1.更换试剂批号后，应校准。
    2.维护保养后如更换光源、清洗比色杯、清洁光路及仪器后光电校正、更换管路等应校准。
    3.质控失控后，在进行其他相应处理后，质控结果仍不满意的，应重新校准。
    4.特殊情况校准要求参见仪器操作维护手册。
    【性能参数】
    1.精密度

质控
批内
总
浓度（g/L）
SD（g/L）
CV%
SD（g/L）
CV%
UN1557
38
0.3
0.79
0.3
0.77
UE1558
25
0.2
0.80
0.2
0.80

    2.检测范围血清和血浆样本为15~60g/L，当样本浓度超过检测范围上限时，可用0.9%生理盐水稀释3~5倍后重新测定，结果乘以稀释倍数。
    3.干扰 以下几种情况对检测值无显著干扰（＜10%）
   胆红素    ≤684μmol/L
    血红蛋白 ≤4.5g/L
    甘油三酯 ≤9.04mmol/L（高脂样本超过反应允许吸光度时，结果将标记
    @，这时应15 000转高速离心15分钟后，取下层清亮液体
    测定。）
    检测系统2：Beckman Coulter UniCel
    【方法与原理】
    1.方法 溴甲酚紫法、终点法。
    2.原理 在存在增溶剂的情况下，溴甲酚紫（BCP）在pH4.9时与白蛋白反应生成有色复合物。复合物在600nm吸光度的增加与样品中白蛋白的浓度成正比。
   
    【仪器】
    Beckman Coulter UniCel DxC系列生化分析仪。
    【试剂】
    1.试剂厂商 Beckman Coulter。
    2.试剂 每套试剂包括两个白蛋白试剂盒（2×300人份），货号442765。成分：溴甲酚紫0.28mmol/L，还包含一些不参与反应的成分用于保证试剂的最佳性能。
    3.试剂稳定性 密封室温保存至标注的有效期。开瓶后在仪器内可稳定30天（在有效期内），不可冻存。
    4.质控品 Bio-Rad公司Liquichek人血清不定值临床化学控制品，691及692两个水平。
    5.校准品 Beckman Coulter SYNCHRON多项校准液，靶值参见不同批号说明书。保存和稳定性：密封贮存于- 20~-15℃至有效期。开瓶后2~8℃稳定20天（在有效期内）。
    【参数设置】
    1.Sample vol：3μl
    2.Reagent vol：300μl（试剂A 300μl）
    3.Method：EP-2
    4.Wavelength：600nm
    5.Temperature：37℃
    6.Time：共105秒，读点时间75~105秒
    【项目校准】
    1.定期校准：14天。
    2.更换试剂批号后，应校准。
    3.仪器更换光源和（或）更换主要备件后，应重新校准。
    4.质控失控后，在进行其他相应处理后，质控结果仍不满意的，应重新校准。
    【性能参数】
    1.精密度

质控
批内
总
浓度（g/L）
SD（g/L）
CV%
SD（g/L）
cv26
16391
28.84
0.19
0.7
0.28
1.0
16392
42.00
0.26
0.6
0.39
0.9

    2.检测范围 血清和血浆标本为10~70g/L，当样品中白蛋白的含量超出系统的测试线性范围，可用生理盐水（或试剂级别的水）稀释3~5倍后重新测定，结果乘以稀释倍数。
    3.干扰 明显溶血标本不能使用，脂血标本应15 000转高速离心15分钟后取下层清亮液体测定。有些药物和患者的自身状况可能影响白蛋白测定。
    检测系统3：Siemens Dimension
    【方法与原理】
    1.方法 溴甲酚紫法、终点法。
    2.原理 在存在增溶剂的情况下，溴甲酚紫（BCP）在pH4.9时与白蛋白反应生成有色复合物。复合物在600nm吸光度的增加与样品中白蛋白的浓度成正比。
   
    【仪器】
    Siemens Dimension系列全自动生化分析仪。
    【试剂】
    1.试剂厂商 Siemens。
    2.试剂 （1~6孔，液体）1.7×10-4 mmol/L溴甲酚紫染料（反应体系浓度，下同），1.0mol/L乙酸盐缓冲液，表面活性剂，微生物抑制剂。
    3.试剂稳定性 未开封试剂2~25℃保存至试剂盒标示有效期，开封后2~8℃可稳定30天，单孔打孔后可稳定72小时。
    4.校准品 Siemens公司CHEM Ⅰ多项校准液（Cat NO.0DC18A），靶值参见不同批号说明书。
    【参数设置】
    1.Sample vol：5μl Auto Dil vol：2μl
    2.Reagent 1 vol：125μl Dil vol：370μl
    3.Wavelength Pri：600nm Sec：540nm
    4.Method：end Reaction：（+）
    5.Dynamic range：6~80g/L
    【项目校准】
    1.定期校准：90天。
    2.更换试剂批号后，应校准。
    3.维护保养后如更换光源、清洗比色杯、清洁光路及仪器后光电校正、更换管路等应校准。
    4.质控失控后，在进行其他相应处理后，质控结果仍不满意的，应重新校准。
    5.特殊情况校准要求参见仪器操作维护手册。
    【性能参数】
    1.精密度

    浓度（g/L）
批内
总
SD（g/L）
CV%
SD（g/L）
CV%
水平1
42
0.56
1.3
0.72
1.7
水平2
32
0.50
1.6
0.73
2.3

    2.检测范围 血清和血浆样本为6~80g/L，当样本浓度超过检测范围上限时，由仪器自动稀释重复，结果自动乘以稀释倍数。
    3.干扰 以下几种情况对检测值无显著干扰（＜10%）
    胆红素    ≤342μmol/L
    血红蛋白 ≤5g/L
    甘油三酯 ≤6.86mmol/L（高脂样本超过反应允许吸光度，仪器报警
    “abnormal reaction”，这时应15 000转高速离心15分钟后，取
    下层清亮液体测定。）
    【参考范围】
    本实验室：35~51g/L（3.5~5.1g/dl）。
    单位转换：g/dl×10= g/L
    【临床意义】
    1.PA降低
    （1） PA是一种负急性时相反应蛋白，在炎症和恶性疾病时血清水平下降。
    （2） PA在肝脏合成，各类肝炎、肝硬化致肝功能损害时，由于合成减少，水平减低，是肝功能障碍的一个敏感指标，对肝病早期诊断有一定价值。
    （3） PA和视黄醇结合蛋白可作为蛋白质营养状况的指征。一旦患者营养不良，PA浓度即迅速下降。
    （4）蛋白消耗性疾病或肾病时，PA浓度下降。
    （5）妊娠或高雌激素血症，PA浓度下降。
    2.PA升高见于Hodgkin病。
    【标本要求】
    1.空腹采静脉血3.1ml（血清，应避免溶血）。
    2.血清2~8℃稳定7天。
    【方法与原理】
   1.方法 免疫比浊法、终点法。
    2.原理 样品中的PA和抗人PA抗体包被的微粒子反应形成不溶性复合物，在波长340nm处检测反应吸光度，浊度和样品中PA的浓度成比例。
    【仪器】
    Beckman Coulter AU系列全自动生化分析仪。
    【试剂】
    1.试剂厂商芬兰Orion。
    2.试剂1 PA缓冲液。
    3.试剂2 抗人PA抗体包被的微粒子，使用前用10ml PA缓冲液稀释。
    4.试剂稳定性未开瓶试剂2~8℃保存至试剂盒标示有效期。
    5.质控品 Bio-Rad公司Liquichek人血清不定值临床化学控制品，691及692两个水平。
    6.校准品 Orion公司PA校准液（5水平），靶值参见不同批号说明书。
    【参数设置】
    1.Sample vol：2.4μl Dil voi：0μl Pre-Dilution Rate：1
    2.Reagent 1 vol：120μl Dil voi：0μl
    3.Reagent 2 vol：52μI Dil vol：0μl
    4.Wavelength Pri：340nm Sec：800nm
    5.Point Fst：27 Lst：10
    6.Method：end Reaction：（+）
    7.Reagent OD Limit：First L-0.1 First H 1.5 Last L-0.1 Last H 1.5
    8.Dynamic range：0.03~0.8
    9.Cal type：5AB
    10.Correlation factor：See updated information on parameters
    【项目校准】
    1.更换试剂批号后，应校准。
    2.维护保养后如更换光源、清洗比色杯、清洁光路及仪器后光电校正、更换管路等应校准。
    3.质控失控后，在进行其他相应处理后，质控结果仍不满意的，应重新校准。
    4.特殊情况校准要求参见仪器操作维护手册。
    【性能参数】
    1.精密度

质控
批内
总
浓度（mg/L）
SD（mg/L）
CV%
SD（mg/L）
CV%
UN1557
228
4.82
2.11
4.76
2.09
UE1558
199
1.76
0.88
1.65
0.83

    2.检测范围 血清和血浆样本为22~670mg/L，当样本浓度超过检测范围上限时报＞670mg/L。
    3.干扰 以下几种情况对检测值无显著干扰
    胆红素    ≤400μmol/L
    血红蛋白 ≤5.0g/L
    甘油三酯 ≤6.78mmol/L（高脂样本超过反应允许吸光度时，结果将标记@，
    这时应15 000转高速离心15分钟后，取下层清亮液体测定。）
    【参考范围】
    本实验室：180~400mg/L。
    【临床意义】
    总胆红素升高见于：
    （1）胆红素生成增加、感染等引起的肝前性黄疸，如溶血性贫血、新生儿溶血、红细胞增多症、阵发性睡眠性血红蛋白尿、疟疾、输血反应、烧伤及大血肿的吸收。
    （2）由感染或毒性导致肝实质性损伤所引起的肝细胞性黄疸，如急性黄疸性肝炎、慢性活动期肝炎、原发性胆汁性肝硬化、药物性肝损伤、中毒、胆汁性肝炎、肝细胞性肝癌等。另外，胆红素代谢性疾病如Gilbert综合征等也属于肝细胞性黄疸。
    （3）胆红素在肝外排泄障碍的肝后性黄疸，如胆结石、肝蠕虫感染、胆管癌、胰头癌等。（表1-2）
    表1-2 不同类型黄疸的鉴别

类型
未结合（间接）胆红素
结合（直接）胆红素
正常
溶血性黄疸
肝细胞性黄疸
梗阻性黄疸
有
高度增加
增加
不变或微增
无或极微
正常或微增
增加
高度增加

    【标本要求】
    1.空腹采静脉血3.0ml（血清或肝素锂抗凝血浆），应避免溶血。
    2.标本应尽量避光保存。在避光条件下，血浆/血清常温稳定2小时，2~8℃稳定3天，-20℃稳定3~4个月。
    检测系统1：Beckman Coulter AU
    【方法与原理】
    1.方法 钒酸氧化法、终点法。
    2.原理 样品中的总胆红素与试剂中的钒酸盐作用后，被氧化成胆绿素，原本黄色的总胆红素在波长450nm下的吸光度会减少。
    钒酸盐+总胆红素→胆绿素
    总胆红素在450nm处吸光度下降与样本中总胆红素浓度呈正比。
    【仪器】
    Beckman Coulter AU系列自动生化分析仪。
    【试剂】
    1.试剂厂商 日本和光。
    2.试剂1 0.1mol/L pH2.9枸橼酸盐缓冲液。
    3.试剂2   10mmol/L pH7.O磷酸钠缓冲液；4mmol/L偏钒酸钠。
    4.试剂稳定性 未开盖试剂2~35℃保存至试剂盒标示有效期，开盖后2~8℃可稳定30天。
    5.质控品 Bio-Rad公司Liquichek人血清不定值临床化学控制品，691及692两个水平。
    6.校准品 和光公司多项校准液（412-73291），靶值参见不同批号说明书。
    【参数设置】
    1.Sample voi：5μl Dil vol：0μl Pre-Dilution Rate：1
    2.Reagent 1 vol：25μl Dil Voi：100μl
    3.Reagent 2 vol：0μl Dil vol：0μl
    4.Wavelength Pri：450nm Sec：540nm
    5.Point Fst：0 Lst：10
    6.Method：end Reaction：（+）
    7.Reagent OD Limit：First 1-0.1 First H 0，1 Last 1-0.1 Last H 0.1
    8.Dynamic range：0~513
    9.Cal type：AB
    10.Correlation factor：See updated information on parameters
    【项目校准】
    1.定期校准，参照厂商说明。
    2.更换试剂批号后，应校准。
    3.维护保养之后如更换光源、清洗比色杯、清洁光路及仪器后光电校正、更换管路等应校准。
    4.质控失控后，在进行其他相应处理后，质控结果仍不满意的，应重新校准。
    5.特殊情况校准要求参见仪器操作维护手册，
    【性能参数】
    1.精密度 CV＜5%。
    2.检测范围 血清和血浆样本为0~428μmol/L，当样本浓度超过检测范围上限时，可用0.9%生理盐水稀释2~10倍后重新测定，结果乘以稀释倍数。
    3.干扰 溶血标本对检测有轻度负干扰；严重脂血标本应15 000转高速离心15分钟后，取下层清亮液体测定。
    检测系统2：Beckman Coulter UniCel
    【方法与原理】
    1.方法 重氮法（双波长）。
    2.原理 在加速剂咖啡因存在时，样品中的总胆红素与试剂中的重氮盐作用后，生成蓝色产物，在520nm处检测吸光度的增加，与样品中的总胆红素浓度成正比。
   
    【仪器】
    Beckman Coulter UniCel DxC系列生化分析仪。
    【试剂】
    1.试剂厂商 Beckman Coulter。
    2.试剂 每套试剂包括2个总胆红素试剂盒（2×400人份），货号476861。成分：苯甲酸钠347mmol/L，咖啡因173.9mmol/L，对氨基苯磺酸钠27mmol/L，HC1 50mmol/L，硝酸钠0.36mmol/L，乙酸钠609mmol/L，还包含一些不参与反应的成分用于保证试剂的最佳性能。
    3.试剂稳定性 密封室温保存至标注的有效期。开瓶后在仪器内可稳定30天（在有效期内），不可冻存。
    4.试剂准备 从三联腔试剂盒的C腔定量转移200μl试剂到B腔，重新盖好三联腔试剂盒的盖子，轻轻倒转几次以充分混匀。
    5.质控品 Bio-Rad公司Liquichek人血清不定值临床化学控制品：691和692两个水平。
    6.校准品 胆红素校正液，货号465915。密封贮存于-20~-15℃至有效期。开瓶后2~8℃稳定24小时（在有效期内）。
    【参数设置】
    1.Sample vol：8μl
    2.Reagent vol：280μl（试剂A：255μl，试剂B：25μl）
    3.Method：EP-2
    4.Wavelength：520nm
    5.Temperature：37℃
    6.Time：150秒，读点时间120~150秒
    【项目校准】
    1.定期校准：14天。
    2.更换试剂批号后，应校准。
    3.仪器更换光源和（或）更换主要备件后应重新校准。
    4.质控失控后，在进行其他相应处理后，质控结果仍不满意的，应重新校准。
    5.特殊情况校准要求参见仪器操作维护手册。
    【性能参数】
    1.精密度

质控
批内
总
浓度（μmol/L）
SD（μmol/L）
CV%
SD（μmol/L）
CV%
16391
17.7
0.95
5.4
1.71
9.6
16392
78.2
0.96
1.2
1.01
1.3

    2.检测范围 血清和血浆标本为1.7~513.0μmol/L。当样品中总胆红素的含量超出系统的测试线性范围，可用生理盐水（或试剂级别的水）稀释后测定，将测试结果乘以稀释倍数就得到原始样品中总胆红素的浓度。
    3.干扰物质 明显溶血标本不能使用，脂血标本应15 000转高速离心15分钟后，取下层清亮液体测定。
    检测系统3：Siemens Dimension
    【方法与原理】
    1.方法 重氮法。
    2.原理 重氮化对氨基苯磺酸由亚硝酸钠和对氨基苯磺酸在低pH时结合而形成。样本中的胆红素（非结合的）通过在咖啡因/苯甲酸盐/醋酸盐/ED-TA的混合剂中稀释而溶解。在添加重氮化的对氨基苯磺酸时，增溶的胆红素，包括结合的胆红素和delta形态（胆红素共价结合白蛋白）都被转化为重氮胆红素。重氮胆红素在540nm处吸光度上升与总胆红素浓度成正比。
    【仪器】
    Siemens Dimension系列全自动生化分析仪。
    【试剂】
    1.试剂厂商 Siemens。
    2.试剂1 （1，4~6孔）液体，lOOmmol/L咖啡因，200mmol/L苯甲酸钠，1.5mmol/L EDTA二钠盐。
    3.试剂2 （2孔）液体，3.4mmol/L对氨基苯磺酸，17mmol/L盐酸；（3孔）液体，0.35mmol/L亚硝酸钠。
    4.试剂稳定性 未开封试剂2~8℃保存至试剂盒标示有效期，开封后2~8℃可稳定30天；试剂打孔后，1，4~6孔可稳定5天，2孔可稳定15天，3孔可稳定72小时。
    5.质控品 Bio-Rad公司Liquichek人血清不定值临床化学控制品，691及692两个水平。
    6.校准品 Siemens公司TBil/DBil校准品（cat No DC17），靶值参见不同批号说明书。
    【参数设置】
    1.Sample vol：28μl Auto Dilute vols：4μl
    2.Reagent 1 vol：250μl
    3.Reagent 2 vol：57μl Dil vol：87μl
    4.Wavelength Pri：540nm Sec：700nm
    5.Method：end Reaction：（+）
    6.Dynamic range：0~428
    【项目校准】
    1.定期校准：3个月。
    2.更换试剂批号后，应校准。
    3.维护保养后如更换光源、清洗比色杯、清洁光路及仪器后光电校正、更换管路等应校准。
    4.质控失控后，在进行其他相应处理后，质控结果仍不满意的，应重新校准。
    5.特殊情况校准要求参见仪器操作维护手册。
    【性能参数】
    1.精密度

    浓度（μmol/L）
批内
总
SD（μmollL）
CV%
SD（μmol/L）
CV%
水平1
16.10
0.2
1.2
2.4
15.5
水平2
18.94
2.1
0.6
9.6
3.0

    2.检测范围 血清和血浆样本为0~428μmol/L，当样本浓度超过检测范围上限时，仪器可自动稀释7倍。
    3.干扰 以下几种情况对检测值无显著影响（＜10%）
    血红蛋白≤5g/L
    甘油三酯≤6.86mmol/L（高脂样本超过反应允许吸光度，仪器报警
    “abnormal reaction”，且不报告结果，这时应15 000转高速离心
    15分钟后，取下层清亮液体测定。）
    【参考范围】
    本实验室：5.1~22.2μmol/L（0.3~1.3mg/dl）。
    新生儿： 0~1天24~149μmol/L（1.4~8.7mg/dl）。
    2天      58~197μmol/L（3.4~11.5mg/dl）。
    3~5天    26~205μmol/L（1.5~12.0mg/dl）。
    单位转换：mg/dl×17.1=μmol/L
    【临床意义】
    1.直接胆红素升高
    （1）病毒性肝炎、肝硬化及各种药物、酒精所致的肝细胞性黄疸。
    （2）胆石症、胆管、肝门、壶腹部、胰腺癌肿所致的阻塞性黄疸。
    2.黄疸鉴别见总胆红素。
    【标本要求】
    1.空腹采静脉血3.0ml（血清或肝素锂抗凝血浆），应避免溶血。
    2.标本应尽量避光保存。在避光条件下，血浆/血清常温稳定2小时，2~8℃稳定3天，-20℃稳定3~4个月。
    检测系统1：Beckman Coulter AU
    【方法与原理】
    1.方法 钒酸氧化法。
    2.原理 样品中的直接胆红素与试剂中的钒酸盐作用后，被氧化成胆绿素，原本黄色的直接胆红素在波长450nm下的吸光度会减少。
    钒酸盐十直接胆红素→胆绿素
    直接胆红素在450nm处吸光度下降与样本中直接胆红素浓度成正比。
    【仪器】
    Beckman Coulter AU系列自动生化分析仪。
    【试剂】
    1.试剂厂商 日本和光。
    2.试剂1  0.1mol/L pH2.9酒石酸缓冲液。
    3.试剂2 10mmol/L pH7.0磷酸钠缓冲液；4mmol/L偏钒酸钠。
    4.试剂稳定性 未开盖试剂2~35℃保存至试剂盒标示有效期，开盖后2~8℃可稳定30天。
    5.质控品 Bio-Rad公司Liquichek人血清不定值临床化学控制品，691及692两个水平。
    6.校准品 和光公司多项校准液（412-73291），靶值参见不同批号说明书。
    【参数设置】
    1.Sample vol：2.5μl   Dil vol：0μl Pre-Dilution Rate：1
    2.Reagent 1 vol：25μl Dil vol：100μl
    3.Reagent 2 vol：0μl  Dil vol：0μl
    4.Wavelength Pri：450nm Sec：540nm
    5.Point Fst：0 Lst：2
    6.Method：end Reaction：（+）
    7.Reagent OD Limit：First L-0.1 First H 0.1 Last L-0.1 Last H 0.1
    8.Dynamic range：0~171
    9.Cal type：AB
    10.Correlation factor：See updated information on parameters
    【项目校准】
    1.更换试剂批号后，应校准。
    2.维护保养后如更换光源、清洗比色杯、清洁光路及仪器后光电校正、更换管路等应校准。
    3.质控失控后，在进行其他相应处理后，质控结果仍不满意的，应重新校准。
    4.特殊情况校准要求参见仪器操作维护手册。
    【性能参数】
    1.精密度（厂家） CV＜5%。
    2.检测范围 血清和血浆样本为0~205μmol/L，当样本浓度超过检测范围上限时，可用0.9%生理盐水稀释2~10倍后重新测定，结果乘以稀释倍数。
    3.干扰 溶血标本对检测结果有轻微负干扰；严重脂血标本应1 5 000转高速离心15分钟后，取下层清亮液体测定。
    检测系统2：Beckman Coulter UniCel
    【方法与原理】
    1方法 重氮法。
    2原理 在无加速剂咖啡因作用下，样品中的直接胆红素与试剂中的重氮盐作用后，生成蓝色产物，分析仪检测560nm吸光度的变化，这一变化与样品中的直接胆红素浓度成正比。
    直接胆红素十重氮+H+→偶氮胆红素（蓝色）
    【仪器】
    Beckman Coulter UniCel DxC系列生化分析仪。
    【试剂】
    1.试剂厂商 Beckman Coulter。
    2.试剂 每套试剂包括2个直接胆红素试剂盒（2×300人份），货号476856。成分：对氨基苯磺酸钠27mmol/L，HC1 51mmol/L，硝酸钠0.12mmol/L，还包含一些不参与反应的成分用于保证试剂的最佳性能。
    3.试剂稳定性 密封室温保存至有效期。开瓶后在仪器内可稳定30天（有效期内），不可冻存。
    4.试剂准备无须准备直接使用。
    5.质控品 Bio-Rad公司Liquichek人血清不定值临床化学控制品：691和692两个水平。
    6.校准品 Beckman Coulter胆红素校准液，货号465915。密封贮存于-20~-15℃至有效期。开瓶后2~8℃稳定24小时（有效期内）。
    【参数设置】
    1.标本量：10μl
    2.试剂总量：320μl（试剂A：310μl，试剂B：10μl）
    3.测定方式：EP-2
    4.波长：560nm
    5.测试温度：37℃
    6.测试时间：446秒，读点时间414~446秒
    【项目校准】
    1.定期校准：14天。
    2.更换试剂批号后，应校准。
    3.仪器更换光源和（或）更换主要备件后，应重新校准。
    4.质控失控后，在进行其他相应处理后，质控结果仍不满意的，应重新校准。
    5.特殊情况校准要求参见仪器操作维护手册。
    【性能参数】
    1.精密度

质控
批内
总
浓度（μmol/L）
SD（μmol/L）
CV%
SD（μmol/L）
CV%
16391
4.5
0.25
5.7
0.25
5.5
16392
15.9
0.37
2.4
0.46
2.9

    2.检测范围 血清和血浆标本为1.7~171.0μmol/L，当样品中直接胆红素的含量超出系统的测试线性范围，可用生理盐水（或试剂级别的水）稀释后重新测定，将测试结果乘以稀释倍数就得到原始样品中直接胆红素的浓度。
    3.干扰 明显溶血标本不能使用，脂血标本应15 000转高速离心15分钟后取下层清亮液体测定。
    检测系统3：Siemens Dimension
    【方法与原理】
    1.方法 重氮法。
    2.原理 重氮化对氨基苯磺酸由亚硝酸钠和对氨基苯磺酸在低pH时结合而形成。样本中的胆红素（非结合的）通过在咖啡因/苯甲酸盐/醋酸盐/ED-TA的混合剂中稀释而溶解。在添加重氮化对氨基苯磺酸时，增溶的胆红素，包括结合的胆红素和delta形态（胆红素共价结合白蛋白）都被转化为重氮胆红素。重氮胆红素在540nm处吸光度上升与总胆红素浓度成正比。
    直接胆红素十重氮+H+→偶氮胆红素（蓝色）
    【仪器】
    Siemens Dimension系列全自动生化分析仪。
    【试剂】
    1.试剂厂商 Siemens。
    2.试剂1（5孔）液体，0.5%亚硝酸钠；（6孔），液体，0.5mol/L盐酸。
    3.试剂2（7~8孔）液体，0.45%对氨基苯磺酸，1.09%盐酸。
    4.试剂稳定性 未开封试剂2~8℃保存至试剂盒标示有效期，开封后2~8℃可稳定30天；试剂打孔后，可稳定48小时。
    5.质控品 Bio-Rad公司Liquichek人血清不定值临床化学控制品，691及692两个水平。
    6.校准品 Siemens公司TBil/DBil校准品（cat No DC17），靶值参见不同批号说明书。
    【参数设置】
    1.Sample vol：31μl Auto Dilute vols：5μ1
    2.Reagent 1 v01：30μl
    3.Reagent 2 vol：60μl Dil vol：324μl
    4.Wavelength Pri：540nm Sec：700nm
    5.Method：end Reaction：（+）
    6.Dynamic range：0~205
    【项目校准】
    1.更换试剂批号后，应校准。
    2.维护保养后如更换光源、清洗比色杯、清洁光路及仪器后光电校正、更换管路等应校准。
    3.质控失控后，在进行其他相应处理后，质控结果仍不满意的，应重新校准。
    4.特殊情况校准要求参见仪器操作维护手册。
    【性能参数】
    1.精密度

浓度（μmol/L）
批内
总
SD（μmol/L）
CV%
SD（μmol/L）
CV%
水平1
82
0.3
0.5
3.6
4.4
水平2
85
0.5
0.54
4
4.7

    2.检测范围 血清和血浆样本为0~205μmol/L，当样本浓度超过检测范围上限时，仪器可自动稀释6倍。
    3.干扰 甘油三酯≤6.77mmol/L对检测值无显著影响（＜10%）（高脂样本超过反应允许吸光度，仪器报警“abnormal reaction”，且不报告结果，这时应15 000转高速离心15分钟后，取下层清亮液体测定）。
    【参考范围】
    本实验室：0~8.6μmol/L（0~0.5mg/dl）。
    单位转换：mg/dl×17.1= μmol/L
    【临床意义】
    ALT升高见于：
    1.肝胆疾病，如急性传染性肝炎、中毒性肝炎、肝癌、肝硬化活动期、脂肪肝、胆管炎、胆囊炎、急性重型肝炎等。同时可以计算DeRitis比值（AST/ALT），急性肝炎比值＜1，肝硬化比值≥2，肝癌≥3。重症肝炎时，随着大量肝细胞的坏死，ALT逐渐下降，胆红素增高出现“酶胆分离”现象。
    2.心肌梗死、心肌炎、充血性心力衰竭等心血管疾病常因肝脏淤血而使血清ALT升高。
    3.骨骼肌疾病，如多发性肌炎、肌营养不良以及一些药物和毒物如氯丙嗪、异烟肼、奎宁、水杨酸制剂及酒精、铅、汞、四氯化碳或有机磷等可引起ALT活性升高。
    【标本要求】
    1.空腹采静脉血3.0ml（血清或肝素锂抗凝血浆）。
    2.全血室温稳定1~2小时，血浆/血清常温稳定8小时，2~8℃稳定2天，-80~-20℃可稳定更长时间。
    3.应该避免标本溶血。
    检测系统l：Beckman Coulter AU
    【方法与原理】
    1.方法 酶法、速率法。
    2.原理 IFCC推荐的酶法。反应式如下：
   
    上述酶偶联反应中NADH在340nm吸光度的下降与样本中ALT的活性成正比。
    【仪器】
    Beckman Coulter AU系列生化分析仪。
    【试剂】
    1.试剂厂商 Beckman Coulter。
    2.试剂1 100mmol/L Tris缓冲液（pH7.15），500mmol/L L-丙氨酸，0.2mmol/L NADH、大于1.8KU/L LDH。
    3.试剂2 12mmol/L α-酮戊二酸。仪器会自动稀释和混合试剂。
    4.试剂稳定性未开盖试剂2~8℃保存至试剂盒标示效期，开盖后2~8℃Rl可稳定7天，R2可稳定30天。
    5.质控品 Bio-Rad公司Liquichek人血清不定值临床化学控制品，691及692两个水平。
    6.校准品Beckman Coulter公司多项校准液（66300），靶值参见不同批号说明书。
    【参数设置】
    1.Sample vol：5μl Dil vol：0μl Pre-Dilution Rate：1
    2.Reagent 1 vol：50μl Dil vol：25μl
    3.Reagent 2 vol：25μl Dil vol：25μl
    4.Wavelength Pri：340nm Sec：660nm
    5.Point Fst：14 Lst：27
    6.Method：rate Reaction：（-）
    7.Linearity：15%
    8.Lag Time：yes
    9.Min OD：0.6 Max OD：2.5
    10.Reagent OD Limit：First L1.1   First H 2.5 Last L 1.1   Last H 2.5
    11.Dynamic range：3~500
    12.Cal type：AB
    13.Correlation factor：See updated information on parameters
    【项目校准】
    1.更换试剂批号后，应校准。
    2.维护保养后如更换光源、清洗比色杯、清洁光路及仪器后光电校正、更换管路等应校准。
    3.质控失控后，在进行其他相应处理后，质控结果仍不满意的，应重新校准。
    4.特殊情况校准要求参见仪器操作维护手册。
    【性能参数】
    1.精密度

质控
批内
总
浓度（U/L）
SD（U/L）
CV%
SD（U/L）
CV%
UN1557
39
1.03
2.66
2.66
2.79
UE1558
124
1.22
0.98
1.28
1.03

    2.检测范围 血清和血浆样本为3~1000U/L，当样本浓度超过检测范围上限时，可用0.9%生理盐水稀释2~20倍后重新测定，结果乘以稀释倍数。
    3.干扰 以下几种情况对检测值无显著干扰（＜10%）
    胆红素    ≤684μmol/L
    血红蛋白≤5.0g/L
    甘油三酯≤3.39mmol/L（高脂样本超过反应允许吸光度时，结果将标记
    @，这时应15 000转高速离心15分钟后，取下层清亮液体
    测定。）
    检测系统2：Beckman Coulter UniCel
    【方法与原理】
    1.方法 酶法、动力学速率法。
    2.原理  IFCC推荐的酶法。反应式如下：
   
    上述酶偶联反应中NADH在340nm吸光度的下降与样本中ALT的活性成正比。
    【仪器】
    Beckman Coulter UniCel iclass系列生化免疫分析仪。
    【试剂】
    1.试剂厂商 Beckman Coulter。
    2.试剂 每套试剂包括两个丙氨酸氨基转移酶试剂盒（2×400人份），货号476826。成分：α-酮戊二酸16mmol/L，乳酸脱氢酶（LD）＞2300IU/L，L-丙氨酸500mmol/L，Tris缓冲液97mmol/L，0.18mmol/L NADH，还包含一些不参与反应的成分用于保证试剂的最佳性能。
    3.试剂稳定性 2~8℃密封贮存至效期，开瓶后稳定30天（在有效期内）。不可冻存。
    4.质控品 Bio-Rad公司Liquichek人血清不定值临床化学控制品，691及692两个水平。
    【参数设置】
    1.标本量：23μl
    2.试剂总量：250μl（试剂A：242μl，试剂B：8μl）
    3.测定方式：RATE-1
    4.波长：340nm
    5.测试温度：37℃
    6.测试时间：共176秒，读点时间112~176秒
    【项目校准】
    无须校准。
    【性能参数】
    1.精密度

质控
批内
总
浓度（U/L）
SD（U/L）
CV%
SD（U/L）
CV%
16391
32
0.64
2.0
O.74
2.4
16392
91
1.43
1.6
1.52
1.7

    2.检测范围 血清和血浆样本为5~2600U/L。当样本浓度超过检测范围上限时，可用0.9%生理盐水稀释3~5倍后重新测定，结果乘以稀释倍数。
    3.干扰 明显溶血标本不能使用，溶血可造成结果假阳性升高。肉眼脂血标本应15 000转高速离心15分钟后，取下层清亮液体测定。
    检测系统3：Siemens Dimension
    【方法与原理】
    1.方法 酶法、速率法。
    2.原理 IFCC推荐酶法的改良方法，将5-磷酸吡哆醛（P5P）作为活化剂来代替三羟甲基氨基甲烷缓冲液。反应如下：
   
    上述酶偶联反应中NADH在340nin吸光度的下降与样本中ALT的活性成正比。
    【仪器】
    Siemens Dimension系列全自动生化分析仪。
    【试剂】
    1.试剂厂商 Siemens。
    2.试剂1：（1~3孔）片剂，0.22mmol/L NADH（反应体系浓度，下同），3000U/L LDH，0.15mmol/L P5P；试剂2：（4~6孔）片剂，20mmol/L α-酮戊二酸；试剂3：260mmol/L乳酸；试剂4：100mmol/L Tris缓冲液。仪器会自动稀释和混合试剂。
    3.试剂稳定性 未开封试剂2~8℃保存至试剂盒标示效期，开封未打孔2~8℃可稳定30天，打孔后可稳定72小时。
    4.质控品 Bio-Rad公司Liquichek人血清不定值临床化学控制品，691及692两个水平。
    5.校准品 Siemens公司Enzyme Verifier（Cat.No.DC19），靶值参见不同批号说明书。
    【参数设置】
    1.Standard vol：35μl Auto Dilute vols：7μl
    2.Reagent 1 vol：30μl
    3.Reagent 2 vol：80μl
    4.Wavelength Pri：340nm Sec：700nm
    5.Method：rate Reaction：（-）
    6.Reagent OD Limit：First L 1.1 First 2.5 Last L 1.1 Last H 2.5
    7.Dynamic range：0~1000
    【项目校准】
    1.定期校准 3个月。
    2.更换试剂批号后，应校准。
    3.维护保养后如更换光源、清洗比色杯、清洁光路及仪器后光电校正、更换管路等应校准。
    4.质控失控后，在进行其他相应处理后，质控结果仍不满意的，应重新校准。
    5.特殊情况校准要求参见仪器操作维护手册。
    【性能参数】
    1.精密度

    浓度（U/L）
批内
总
SD（U/L）
CV%
SD（U/L）
CV%
水平1
34
1.7
5.0
2.6
7.7
水平2
173
2.6
1.5
4.6
2.7

    2.检测范围 血清和血浆样本为0~1000U/L，当样本浓度超过检测范围上限时，需用生理盐水稀释2~10倍后检测，结果乘以稀释倍数。
    3.干扰 以下几种情况对检测值无显著影响（＜10%）
    胆红素    ≤342μmol/L
    血红蛋白 ≤5g/L
    甘油三酯 ≤9.12mmol/L（高脂样本超过反应允许吸光度，仪器报警
    “abnormal reaction”，这时应15 000转高速离心15分钟后，取
    下层清亮液体测定。）
    【参考范围】
    本实验室：5~40U/L。
    【临床意义】
    AST升高见于
    1.肝胆疾病，各型急慢性肝炎、肝硬化、肝癌等。DeRitis比值（AST/ALT）对于评价肝脏疾病有重要意义：正常人血清AST/ALT比值为1.15，AST/ALT＜1见于急性病毒性肝炎，并随着疾病的进展而降低；肝硬化时比值常＞2.0；原发性肝癌比值常＞3.0。另外，胆汁淤积、胆管炎等也可见AST升高。
    2.心脏疾病 心肌细胞内含有大量AST，心肌损伤后AST即可透过受损的细胞膜进入血液。心肌梗死患者胸前区疼痛发作后6~8小时血中AST明显升高，48~60小时达峰值，3~5天降至正常。
    3.其他疾病 肌营养不良患者血清AST显著升高。外伤或手术后肌肉损伤、皮肌炎、肝损伤、重度烧伤后肾小管坏死、脑外伤、脑栓塞或血栓及心导管术及心脏手术、急性胰腺炎、急性溶血性贫血、妊娠中毒症、恶性肿瘤、白血病等AST也可升高。
    【标本要求】
    1.空腹采静脉血3.0ml（血清或肝素锂抗凝血浆）。
    2.全血室温稳定1~2小时，血浆/血清常温稳定3天，2~8℃稳定7天。
    3.应该避免标本溶血，避免在过度的肌运动后采血。避免冷冻，因为在融冻时很容易破坏酶的活性。
    【方法与原理】
    1.方法 酶法、速率法。
    2.原理 IFCC推荐的酶法。反应式如下：
   
    上述酶偶联反应中NADH在340nm吸光度的下降与样本中AST的活性成正比。
    【仪器】
    Beckman Coulter AU系列生化分析仪。
    【试剂】
    1.试剂厂商 Beckman Coulter。
    2.试剂1：80mmol/L Tris缓冲液（pH7.8）、240mmol/L L-天冬氨酸、0.2mmol/L NADH、MDH（≥0.6KU/L）、乳酸脱氢酶（≥0.9KU/L）；试剂2：12mmol/L α-酮戊二酸。仪器会自动稀释和混合试剂。
    3.试剂稳定性 未开盖试剂2~8℃保存至试剂盒标示效期，开盖后2~8℃Rl可稳定7天，R2可稳定30天。
    4.质控品 Bio-Rad公司Liquichek人血清不定值临床化学控制品，691及692两个水平。
    5.校准品 Beckman Coulter公司多项校准液（66300），靶值参见不同批号说明书。
    【参数设置】
    1.Sample vol：5μl Dil vol：0μl Pre-Dilution Rate：1
    2.Reagent l vol：25μl Dil vol：25μl
    3.Reagent 2 vol：25μl   Dil vol：50μl
    4.Wavelength Pri：340nm Sec：660nm
    5.Point Fst：14 Lst：27
    6.Method：rate Reaction：（-）
    7.Linearity：15%
    8.Lag Time：yes
    9.Min OD：0.6 Max OD：2.5
    10.Reagent OD Limit：First L 1.1   First H 2.5 Last L 1.1   Last H 2.5
    11.Dynamic range：3~1000
    12.Cal type：AB
    13.Correlation factor：See updated information on parameters
    【项目校准】
    1.更换试剂批号后，应校准。
    2.维护保养后如更换光源、清洗比色杯、清洁光路及仪器后光电校正、更换管路等应校准。
    3.质控失控后，在进行其他相应处理后，质控结果仍不满意的，应重新校准。
    4.特殊情况校准要求参见仪器操作维护手册。
    【性能参数】
    1.精密度

质控
批内
总
浓度（U/L）
SD（U/L）
CV%
SD（U/L）
CV%
UN1557
39
1.01
2.56
1.34
3.37
UE1558
163
1.01
0.62
1.77
1.08

    2.检测范围 血清和血浆样本为3~1000U/L，当样本浓度超过检测范围上限时，可用0.9%生理盐水稀释2~20倍后重新测定，结果乘以稀释倍数。
    3.干扰 以下几种情况对检测值无显著影响（＜10%）
    胆红素    ≤684μmol/L
    血红蛋白 ≤4.5g/L
    甘油三酯 ≤11.3mmol/L（高脂样本超过反应允许吸光度时，结果将标记
    @，这时应15 000转高速离心15分钟后，取下层清亮液体
    测定。）
    【参考范围】
    本实验室：5~37U/L。


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