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【医技】检验科医疗诊疗规范——第一篇 临床化学与免疫检验31-40

作者:王泓 日期:2014-06-19

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    【临床意义】
    GGT升高主要用于诊断肝脏疾病。
    1.原发性或转移性肝癌，胰腺癌，阻塞性黄疸，肝内外胆道阻塞，胆道感染，胆石症，急性胰腺炎，黄疸性肝炎，酒精性肝炎，肝硬化，药物性肝炎等GGT升高。
    2.由于乙醇引起GGT合成增加，可用于酒精性肝损伤、酒精中毒、戒酒的监测。
    3.某些药物，如抗惊厥药、口服避孕药可导致GGT升高。
    【标本要求】
    1.空腹采静脉血3.0ml（血清或肝素锂抗凝血浆）。
    2.血浆/血清常温稳定7天，2~8℃稳定7天，-20℃稳定2个月。
    3.应该避免在过度的肌运动后采血。
    【方法与原理】
    1.方法 酶法（改良的Szasz法）、速率法。
    2.原理
   
    上述反应中5-氨基-2-硝基苯甲酸盐在410/480nm吸光度的变化与样本中GGT的活性成正比。
    【仪器】
    Beckman Coulter AU系列自动生化分析仪。
    【试剂】
    1.试剂厂商 Beckman Coulter。
    2.试剂1 Tris缓冲液（pH8.25）、双苷肽、叠氮钠。
    3.试剂2 L-γ-谷氨酰-3-羧基-4-硝基苯胺、叠氮钠。
    4.试剂稳定性 未开盖试剂2~8℃保存至试剂盒标示效期，开盖后2~8℃可稳定30天。
    5.质控品 Bio-Rad公司Liquichek人血清不定值临床化学控制品，691及692两个水平。
    6.校准品 Beckman Coulter公司多项校准液（66300），靶值参见不同批号说明书。
    【参数设置】
    1.Sample vol：4.0μl   Dil vol：0μl   Pre-Dilution Rate：1
    2.Reagent 1 vol：64μl Dil vol：10μl
    3.Reagent 2 vol：64μl Dil vol：10μl
    4.Wavelength Pri：410nm Sec：480nm
    5.Point Fst：16 Lst：23
    6.Method：rate Reaction：（+）
    7.Linearity：15%
    8.Lag Time：No
    9.Min OD：-0.1 Max OD：2.2
    10.Reagent OD Limit：First L-0.1    First H 1.2 Last 1-0.1 Last H 1.2
    11.Dynamic range：5~1200
    12.Cal type：AB
    13.Correlation factor：See updated information on parameters
    【项目校准】
    1.更换试剂批号后，应校准。
    2.维护保养后如更换光源、清洗比色杯、清洁光路及仪器后光电校正、更换管路等应校准。
    3.质控失控后，在进行其他相应处理后，质控结果仍不满意的，应重新校准。
    4.特殊情况校准要求参见仪器操作维护手册。
    【性能参数】
    1.精密度

质控
批内
总
浓度（U/L）
SD（U/L）
CV%
SD（U/L）
CV%
UN1557
70
0.89
1.28
1.18
1.69
UE1558
209
1.69
0.81
3.35
1.61

    2.检测范围 血清和血浆样本为5~1200UlL，当样本浓度超过检测范围上限时，可用0.9%生理盐水稀释2~10倍后重新测定，结果乘以稀释倍数。
    3.干扰 以下几种情况对检测值无显著影响（＜10%）
    胆红素    ≤684μmol/L
    血红蛋白 ≤2.5g/L
    甘油三酯 ≤11.3mmol/L（高脂样本超过反应允许吸光度时，结果将标记
    @，这时应15 000转高速离心15分钟后，取下层清亮液体
    测定。）
    【参考范围】
    本实验室：10~67U/L。
    【临床意义】
    LD是一种细胞质酶，其组织中浓度较血浆中高500倍，轻微组织损伤也可造成其在血清中的活性明显升高。
    LD升高主要见于以下情况：
    1.肝胆管疾病、传染性单核细胞增多症、门脉高压、肝脓肿、肝肿瘤等。
    2.心肌梗死、心肌炎、心导管插入术、心瓣膜修复及置换、肺梗死及肺栓塞等。
    3.骨骼肌疾病，如多发性肌炎、肌营养不良以及癫痫持续状态或大发作、激烈运动等。
    4.溶血性贫血、巨幼细胞性贫血、血栓性血小板减小性紫癜、原发性血小板增多症等。
    5.其他，如肾梗死、手术后、休克、肿瘤等。
    【标本要求】
    1.空腹采静脉血3.0ml（血清或肝素锂抗凝血浆）。
    2.LD对冷冻不稳定，血浆/血清常温稳定7天，2~8℃稳定4天。
    3.应该避免在过度的肌运动后采血。
    【方法与原理】
    1.方法 酶法（L→P）、速率法。
    2.原理
   
    上述酶偶联反应中NADH在340nm吸光度的上升与样本中LD的活性成正比。
    【仪器】
    Beckman Coulter AU系列自动生化分析仪。
    【试剂】
    1.试剂厂商 Beckman Coulter。
    2.试剂 230mmol/L AMP缓冲液（pH8.9），70mmol/L乳酸，10mmol/LNAD+。
    3.试剂稳定性 未开盖试剂2~8℃保存至试剂盒标示效期，开盖后在2~8℃下可保存30天。
    4.质控品 Bio-Rad公司Liquichek人血清不定值临床化学控制品，691及692两个水平。
    5.校准品 Beckman Coulter公司多项校准液（66300），靶值参见不同批号说明书。
    【参数设置】
    1.Sample vol：2.3μl   Dil vol：0μl   Pre-Dilution Rate：1
    2.Reagent 1 vol：62μl Dil vol：21μl
    3.Reagent 2 vol：31μl Dil vol：10μl
    4.Wavelength Pri：340nm Sec：660nm
    5.Point Fst：15 Lst：23
    6.Method：rate Reaction：（+）
    7.Linearity：15%
    8.Lag Time：No
    9.Min OD：-0.1 Max OD：1.7
    10.Reagent OD Limit：First L-0.1 First H 0.6 Last L-0.1 Last H 0.6
    11.Dynamlc range：25~1200
    12.Cal type：AB
    13.Correlation factor：See updated information on parameters
    【项目校准】
    1.更换试剂批号后，应校准。
    2.维护保养后如更换光源、清洗比色杯、清洁光路及仪器光电校正、更换管路等应校准。
    3.质控失控后，在进行其他相应处理后，质控结果仍不满意的，应重新校准。
    4.特殊情况校准要求参见仪器操作维护手册。
    【性能参数】
    1.精密度

质控
批内
总
浓度（U/L）
SD（U/L）
CV%
SD（U/L）
CV%
UN1557
230
2.51
1.09
2.54
1.10
UE15 58
365
2.48
0.68
2.72
0.75

    2.检测范围 血清和血浆样本为25~1200U/L，当样本浓度超过检测范围上限时，可用0.9%生理盐水稀释2~10倍后重新测定，结果乘以稀释倍数。
    3.干扰 以下几种情况对检测值无显著干扰（＜10%）
    胆红素    ≤684μmol/L
    甘油三酯 ≤11.3mmol/L（高脂样本超过反应允许吸光度时，结果将标记
    @，这时应15 000转高速离心15分钟后，取下层清亮液体
    测定。）
    【参考范围】
    本实验室：97~270U/L。
    儿童LD水平高于成人：
    1~30天：150~785U/L。
    1~6个月：160~437U/L。
    7~12个月：145~365U/L。
    13~24个月：86~315U/L。
    2~3岁：106~296U/L。
    【临床意义】
    TBA升高见于：
    1.肝细胞损害，如急性肝炎、慢性活动性肝炎、中毒性肝病、肝硬化和肝癌等，特别对于肝癌，TBA还有助于估计预后和提示病情复发。
    2.肠道梗阻，如胆石症、胆道肿瘤等。
    另外，进食后血清胆汁酸可一过性升高。
    【标本要求】
    1.空腹采静脉血3.0ml（血清或肝素锂抗凝血浆）。血清/血浆2~8℃保存稳定7天，-20℃保存稳定3个月。
    2.应该避免在过度的肌运动后采血。
    【方法与原理】
    1.方法 酶循环法、速率法。
    2.原理
   
    血清中的胆汁酸被3α-羟类固醇脱氢酶（3α-HSD）及β-硫烟酰胺腺苷二核苷酸氧化型（Thio-NAD）氧化，生成3-酮类固醇及β-硫烟酰胺腺苷二核苷酸还原型（Thio-NADH）。生成的3一酮类固醇在3α-HSD及β一烟酰胺腺苷二核苷酸还原型（NADH）的作用下，生成胆汁酸及β-烟酰胺腺苷二核苷酸氧化型（NAD）。通过酶的循环反应，微量的胆汁酸检测信号被放大。循环反应中生成的Thio-NADH在410nm吸光度的上升与血清中胆汁酸的浓度成正比。
    【仪器】
    Beckman Coulter AU系列自动生化分析仪。
    【试剂】
    1.试剂厂商 日本积水医疗株式会社。
    2.试剂1 β-硫烟酰胺腺苷二核苷酸氧化型（Thio-NAD）、缓冲液。 3.试剂2 β-烟酰胺腺苷二核苷酸还原型（NADH）、3α-羟类固醇脱氢酶（3α-HSD）、缓冲液。
    4.试剂稳定性 未开盖试剂2~8℃保存至试剂盒标示效期。
    5.质控品 Bio-Rad公司Liquichek人血清不定值临床化学控制品，691及692两个水平。
    6.校准品 日本积水医疗配套单项校准液，靶值参见不同批号说明书。
    【参数设置】
    1.Sample vol：3.0μl Dil vol：0μl   Pre-Dilution Rate：1
    2.Reagent 1 vol：210μl Dil vol：0μl
    3.Reagent 2 vol：70μl Dil vol：0μl
    4.Wavelength Pri：410nm Sec：660nm
    5.Point Fst：13 Lst：20
    6.Method：rate Reaction：（+）
    7.Linearity：30%
    8.Lag Time：yes
    9.Min OD：-2   Max OD：2.5
    10.Reagent OD Limit：First L-2   First H 2.5 Last L-2   Last H 2.5
    11.Dynamlc range：1.1~180
    12.Cal type：AB
    13.Correlation factor：See updated information on parameters
    【项目校准】
    1.定期校准：每月。
    2.更换试剂批号后，应校准。
   3.维护保养后如更换光源、清洗比色杯、清洁光路及仪器光电校正、更换管路等应校准。
    4.质控失控后，在进行其他相应处理后，质控结果仍不满意的，应重新校准。
    【性能参数】
    1.精密度

质控
批内
总
浓度（μmol/L）
SD（μmol/L）
CV%
SD（μmol/L）
CV%
UN1557
27.2
0.26
0.95
0.44
1.62
UE15 58
42.1
0.24
0.57
0.68
1.59

    2.检测范围 血清和血浆样本为1.1~180μmol/L，当样本浓度超过检测范围上限时，可用0.9%生理盐水稀释3~5倍后重新测定，结果乘以稀释倍数。
    3.干扰 以下几种情况对检测值无显著影响（＜10%）
    胆红素    ≤855 μmol/L
    血红蛋白 ≤5g/L
    甘油三酯 ≤11.3mmol/L（高脂样本超过反应允许吸光度时，结果将标记
    @，这时应15 000转高速离心15分钟后，取下层清亮液体
    测定。）
    【参考范围】
    本实验室：0.1~10μmol/L。
    【临床意义】
    1.ChE降低
    （1）有机磷及氨基甲酸酯农药中毒。
    （2）肝病：急性肝炎仅坏死型ChE活性随病情加重而下降，无并发症的病毒性肝炎，ChE一般正常；慢性肝炎非活动期ALT、AST、GGT可能恢复正常，但ChE仍会下降或维持在参考范围内较低水平；肝硬化是ChE降低最常见的疾病，ChE正常通常可排除肝硬化；慢性肝淤血、肝肿瘤、肿瘤肝转移也可见ChE下降，并随肿瘤的进展而持续下降。
    （3）伴分解代谢增强的严重疾病、休克、危重患者、慢性炎性肠病、进行性肌营养不良、肌强直症、心肌梗死、恶性贫血、旋毛虫病也可有ChE降低，但特异性不高，不能作为诊断依据。
    2.ChE升高可见于糖尿病、冠心病、Ⅳ型高脂血症、脂肪肝、甲状腺功能亢进症、严重肥胖、肾病综合征、渗出性肠病、遗传性非溶血性胆红素血症等，但没有诊断价值。
    【标本要求】
    1.空腹采静脉血3.0ml（血清或肝素锂抗凝血浆）。
    2.血浆/血清常温稳定数十天，-20℃稳定3年。
    3.应该避免在过度的肌运动后采血。
    【方法与原理】
    1.方法 德国临床化学会（GSCC）推荐的酶法、速率法。
    2.原理
   
    上述反应中三价铁氰化物[Fe（CN）6]3-在410nm吸光度的下降与样本中ChE的活性成正比。
    【仪器】
    Beckman Coulter AU系列自动生化分析仪。
    【试剂】
    1.试剂厂商 Beckman Coulter。
    2.试剂 75mmol/L磷酸钠缓冲液（pH6.2），2.0mmol/L铁氰化物，15mmol/L丁酰硫代胆碱，防腐剂。
    3.试剂稳定性 未开盖试剂2~8℃保存至试剂盒标示效期，开盖后2~8℃稳定30天。
    4.质控品 Bio-Rad公司Liquichek人血清不定值临床化学控制品，691及692两个水平。
    5.校准品 Beckman Coulter公司多项校准液（66300），靶值参见不同批号说明书。
    【参数设置】
    1.Sample vol：3.0μl Dil voi：oμl Pre-Dilution Rate：1
    2.Reagent 1 vol：150μl Dil vol：0μl
    3.Reagent 2 vol：30μl Dil vol：0μl
    4.Wavelength Pri：410nm Sec：480nm
    5.Point Fst：16 Lst：20
    6.Method：rate Reaction：（-）
    7.Linearity：15%
    8.Lag Time：NO
    9.Min OD：0.4   Max OD：2.5
    10.Reagent OD Limit：First L 1.1   First H 2.2 Last L 1.1   Last H 2.2
    11.Dynamic range：1~15
    12.Cal type：AB
    13.Correlation factor：See updated information on parameters
    【项目校准】
    1.更换试剂批号后，应校准。
    2.维护保养后如更换光源、清洗比色杯、清洁光路及仪器后光电校正、更换管路等应校准。
    3.质控失控后，在进行其他相应处理后，质控结果仍不满意的，应重新校准。
    【性能参数】
    1.精密度

质控
批内
总
浓度（kU/L）
SD（kU/L）
CV%
SD（kU/L）
cv%
UN15 57
5.26
0.05
0.95
0.06
1.13
UE1558
4.88
0.04
0.82
0.04
0.77

    2.检测范围 血清和血浆样本为1~15kU/L，当样本浓度超过检测范围上限时，可用0.9%生理盐水稀释3~5倍后重新测定，结果乘以稀释倍数。
    3.干扰 以下几种情况对检测值无显著影响（＜10%）
    胆红素    ≤684μmol/L
    血红蛋白 ≤5g/L
    甘油三酯≤11.3mmol/L（高脂样本超过反应允许吸光度时，结果将标记
    @，这时应15 000转高速离心15分钟后，取下层清亮液体
    测定。）
    【参考范围】
    本实验室：4.0~12.6kU/L。
    新生儿几周内ChE浓度仅为成人的50%，6岁时可达成人水平。
    绝经期妇女ChE平均升高15%，孕期妇女ChE平均降低20%~30%。
    【临床意义】
    1.ADA活性升高
    （1） HIV感染者、艾滋病患者明显升高。
    （2）血液病：慢性溶血性疾病、再生障碍性贫血、急性粒细胞白血病、慢性粒细胞白血病和慢性淋巴细胞白血病急变期。
    （3）肝病：急性肝炎时轻、中度升高，重症肝病酶胆分离时ALT不高而ADA明显升高；慢性肝炎、肝硬化、肝细胞癌患者血清ADA活性显著升高。
    （4）其他：肿瘤患者血清及组织中ADA活性均升高，但前者阳性率为15%~40%。伤寒早期，流行性出血热，SLE，系统性硬化病等亦升高。
    （5）鉴别诊断：结核性脑膜炎患者脑脊液中ADA明显高于化脓性及病毒性脑膜炎；结核性胸、腹水ADA活性明显高于非结核性，ADA活性依次为结核性＞癌性＞炎症性。ADA＞40.0U/L提示结核性胸、腹水，ADA＜35.0U/L提示癌性等非结核性胸、腹水。
    2.ADA活性降低 重症联合免疫缺陷病（SCID）：约50%患者有ADA缺陷，其细胞、组织、胎儿羊水中ADA活性显著降低，血清中ADA活性亦低于正常人。
    【标本要求】
    1.空腹采静脉血3.0ml（血清或肝素锂抗凝血浆）。
    2.2~8℃保存不超过3天。
    3.应该避免在过度的肌运动后采血。
    【方法与原理】
    1.方法 酶法、速率法。
    2.原理
   
    PNP：嘌呤核苷磷酸化酶；XOD：次黄嘌呤氧化酶；4-AA：4-氨基安替比林；EHSPT：N-乙醛-N-（二羟基-3-硫丙基）-3-甲基苯胺；POD：过氧化物酶
    上述反应最后生成的醌染料在556nm处的吸光度变化与ADA活性成正比。
    【仪器】
    Beckman Coulter AU系列自动生化分析仪。
    【试剂】
   1.试剂厂商 北京九强生物技术有限公司。
    2.试剂Rl 25mmol/L pH8.0的Tris-HCl； 4mmoI/L 4-AA；0.3U/mlPNP；0.4U/ml XO；0.1U/ml过氧化物酶及稳定剂。
    3.试剂R2 25mmol/L pH4.0的Tris-HCl； 11mmol/L腺苷；4mmol/LEHSPT。
    4.试剂稳定性 未开封或开封试剂盒2~8℃避光密封保存稳定至效期。
    5.质控品 随试剂盒所带的专用质控品：腺苷脱氨酶和BSA，使用前用1ml蒸馏水复溶，复溶后2~8℃稳定7天。
    6.校准品 九强公司ADA校准液，靶值参见不同批号说明书。
    【参数设置】
    1.Sample vol：5.0μl Dil vol：0μl Pre-Dilution Rate：1
    2.Reagent 1 vol：180μl Dil vol：0μl
    3.Reagent 2 vol：90μl Dil vol：0μl
    4.Wavelength Pri：540nm Sec：800nm
    5.Point Fst：20 Lst：25
    6.Method：rate Reaction：（+）
    7.Linearity：30%
    8.Lag Time：yes
    9.Min OD：-2.0   Max OD：2.5
    10.Reagent OD Limit：First L-2.0 First H 2.5 IAst L-2.0 Last H 2.5
    11.Dynamic range：0~200
    12.Cal type：AB type factor：2610
    13.Correlation factor：NA
    【项目校准】
    1.更换试剂批号后，应校准。
    2.维护保养后如更换光源、清洗比色杯、清洁光路及仪器后光电校正、更换管路等应校准。
    3.质控失控后，在进行其他相应处理后，质控结果仍不满意的，应重新校准。
    【性能参数】
    1.精密度 批内CV＜4.5%，批间CV＜6.0%。
    2.检测范围 0~200U/L。若ADA活性高于200U/L，需用0.9%生理盐水稀释2~10倍后检测，结果乘以稀释倍数。
    3.干扰 血红蛋白＜2.0g/L，抗坏血酸＜227.2μmol/L，TG＜8.48mol/L，Bil＜5.1μmol/L对检测结果无显著影响。
    【参考范围】
    本实验室：4~24U/L。
    【临床意义】
    1.TC升高
    （1）甲状腺功能减退、动脉硬化、冠状动脉粥样硬化性心脏病及高脂血症等。
    （2）糖尿病患者，特别是并发糖尿病昏迷时几乎都有总胆固醇升高。
    （3）慢性肾炎肾病期、肾病综合征、类脂性肾病等。
    （4）胆总管阻塞（如结石、肿瘤）时，总胆固醇升高且伴有黄疸，但胆固醇酯与总胆固醇的比值仍正常。
    （5）长期高脂饮食、精神紧张或妊娠期，总胆固醇也可升高。
    2.TC降低
    （1）严重的肝脏疾病患者，如急性重型肝炎或肝硬化时，血清总胆固醇降低，胆固醇酯与总胆固醇的比值也降低。
    （2）严重的贫血患者，如再生障碍性贫血、溶血性贫血、缺铁性贫血等，因骨髓及红细胞合成胆固醇的功能受到影响，血清总胆固醇降低。
    （3）甲状腺功能亢进或严重营养不良时，总胆固醇降低。
    【标本要求】
    1.空腹采静脉血3.0ml（血清或肝素锂抗凝血浆）。
    2.全血室温稳定3小时，血浆/血清常温稳定1天，2~8℃稳定5~7天，-20℃以下可长期保存。
    3.应该避免在过度的肌运动后采血。
    【方法与原理】
    胆固醇氧化酶法（CHOD-PAP）
   
    上述反应的最终产物醌亚胺在600nm外的吸光度变化与TC的浓度成正比。
    【仪器】
    Beckman Coulter AU系列自动生化分析仪。
    【试剂】
    1.试剂厂商 日本积水医疗株式会社。
    2.试剂1 1.8mmol/L；4-氨基安替比林；胆固醇酯酶；过氧化物酶；60mmol/L苯二甲酸缓冲液（pH6.2）。
    3.试剂2 0.98U/ml胆固醇氧化酶，1.1mmol/L ESBmT，60mmol/L苯二甲酸缓冲液（pH6.2）。
    4.试剂稳定性 未开瓶试剂2~8℃可保存至试剂盒标示效期；开瓶后避光和避免微生物污染。
    5.质控品 Bio-Rad公司Liquichek脂类控制品，641及642两个水平。
    6.校准品 日本积水医疗株式会社Seronorm Lipid校准液，靶值参见不同批号说明书。
    【参数设置】
    1.Sample vol：2.5μl   Dil vol：0μl   Pre-Dilution Rate：1
    2.Reagent 1 vol：160μl Dil vol：0μl
    3.Reagent 2 vol：80μl Dil vol：0μl
    4.Wavelength Pri：600nm Sec：700nm
    5.Point 1 Fst：0 Lst：27
   6.Point 2 Fst：0 Lst：10
    7.Method：End Reaction：（+）
    8.Reagent OD Limit：First L-2.0 First H 2.5 Last L-2.0 Last H 2.5
    9.Dynamic range：0~33.67
    10.Cal type：AB
    11.Correlation factor：See updated information on parameters
    【项目校准】
    1.定期校准3个月。
    2.更换试剂批号后，应校准。
    3.维护保养后如更换光源、清洗比色杯、清洁光路及仪器后光电校正、更换管路等应校准。
    4.质控失控后，在进行其他相应处理后，质控结果仍不满意的，应重新校准。
    【性能参数】
    1.精密度

质控
批内
总
浓度（mmol/L）
SD（mmol/L）
CV%
SD（mmol/L）
CV%
UN1557
4.10
0.05
1.16
0.05
1.22
UE1558
7.54
0.04
0.57
0.04
0.52

    2.检测范围 血清和血浆样本为0~33.67mmol/L，当样本浓度超过检测范围上限时，可用0.9%生理盐水或蒸馏水、去离子水稀释3~5倍后重新测定，结果乘以稀释倍数。
    3.干扰 以下几种情况对检测值无显著干扰（＜10%）
    胆红素 ≤20mg/dl
    血红蛋白≤500mg/dl
    抗坏血酸≤50mg/dl
    【参考范围】
    本实验室：2.85~5.70mmol/L（110~220mg/dl）。
    单位转换：mg/dl×0.0259=mmol/L
    【临床意义】
    甘油三酯升高
    1.甘油三酯升高是动脉粥样硬化发生的重要因素之一，甘油三酯可使血液凝固性增强，并抑制纤维蛋白溶解，促进血栓形成，故与冠状动脉硬化性心脏病的发生有密切的关系，约有80%的心肌梗死患者甘油三酯升高。
    2.甘油三酯升高还可见于原发性高脂血症、动脉硬化症、肥胖症、阻塞性黄疸、糖尿病、自身免疫性疾病、口服避孕药物、库欣病、严重贫血、肾病综合征、甲状腺功能减退及高脂饮食等。
    3.大量饮酒后亦可使甘油三酯假性升高。
    【标本要求】
    1.空腹采静脉血3.0ml（血清或肝素锂抗凝血浆）。
    2.全血室温稳定3小时，血浆/血清常温稳定1天，2~8℃稳定5~7天，-20℃稳定3个月，-80℃可长期保存。
    3.应该避免在过度的肌运动后采血。
    【方法与原理】
    甘油磷酸氧化酶法（GPO-PAP）
    （第一反应：去除游离甘油）
   
    （第二反应：甘油三酯测定）
   
    上述反应的最终产物在600nm吸光度变化与甘油三酯成正比。
    【仪器】
    Beckman Coulter AU系列自动生化分析仪。
    【试剂】
    1.试剂厂商 日本积水医疗株式会社。
    2.试剂1 0.90U/ml甘油激酶；3.8U/ml甘油-3-磷酸氧化酶：ATP；1.7mmol/L ESBmT；lOOmmol/L GOOD缓冲液（pH7.0）。
    3.试剂2 1.5mmol/L 4-氨基安替比林；脂蛋白脂肪酶；过氧化物酶；200mmol/L GOOD缓冲液（pH6.5）。
    4.试剂稳定性 未开瓶试剂2~8℃可保存至试剂盒标示效期。
    5.质控品 Bio-Rad公司Liquichek脂类控制品，641及642两个水平。
    6.校准品 日本积水医疗株式会社Seronorm Lipid校准液，靶值参见不同批号说明书。
    【参数设置】
    1.Sample vol：2.5μl   Dil vol：0μl   Pre-Dilution Rate：1
    2.Reagent l vol：160μl Dil vol：0μl
    3.Reagent 2 vol：80μl Dil vol：0μl
    4.Wavelength Pri：600nm Sec：700nm
    5.Point 1 Fst：0 Lst：27
    6.Point 2 Fst：0 Lst：10
    7.Method：End Reaction：（+）
    8.Reagent OD Limit：First L-2.0 First H 2.5 Last L-2.0 Last H 2.5
    9.Dynamic range：0~22.6
    10.Cal type：AB
    11.Correlation factor：See updated informatlon on parameters
    【项目校准】
    1.定期校准3个月。
    2.更换试剂批号后，应校准。
    3.维护保养后如更换光源、清洗比色杯、清洁光路及仪器后光电校正、更换管路等应校准。
    4.质控失控后，在进行其他相应处理后，质控结果仍不满意的，应重新校准。
    【性能参数】
    1.精密度

质控
批内
总
浓度（mmol/L）
SD（mmol/L）
CV%
SD（mmol/L）
CV%
UN1557
1.10
0.01
1.02
0.01
1.06
UE1558
2.84
0.02
0.74
0.03
1.17

    2.检测范围 血清和血浆样本为0~22.6mmol/L，当样本浓度超过检测范围上限时，可用0.9%生理盐水或蒸馏水、去离子水稀释3~5倍后重新测定，结果乘以稀释倍数。
    3.干扰 以下几种情况对检测值无显著影响（＜10%）
    胆红素   ≤20mg/dl
    抗坏血酸 ≤50mg/dl
    血红蛋白 ≤500mg/dl
    【参考范围】
    本实验室：0.45~1.70mmol/L（40~150mg/dl）。
    单位转换：mg/dl×0.0113＝mmol/L
    【临床意义】
    影响HDC-C水平的因素很多，主要有：
    1.年龄、性别儿童时期男女HDL-C水平相同；青春期男性开始下降，至18~19岁达最低点，以后男性低于女性；女性绝经期后与男性接近。
    2.种族 黑人比白人HDL-C高，美国人比中国人高，中国人与日本人、欧洲人接近。
    3.饮食 高糖及素食时HDL-C降低；高饱和脂肪膳食通常不影响HDL-C水平（使TC及LDL-C升高）；蛋白质的质与量对HDL-C似无影响。
    4.肥胖 肥胖者常有TG升高，同时伴有HDL-C降低。
    5.饮酒与吸烟 饮酒使HDL-C升高，而吸烟使HDL-C减低。
    6.运动 长期足够量的运动使HDL-C升高。
    7.药物 睾酮等雄性激素、降脂药中的丙丁酚、β受体阻断剂、噻嗪类利尿药等，使HDL-C降低；雌激素类药物、烟酸和苯氧乙酸类降脂药、美降脂（洛伐他汀）、苯妥英钠等，使HDL-C升高。
    8.美国胆固醇教育计划成人治疗组第三次指南（NCEP-ATPⅢ）提出HDL-C＞60mgldl对冠状动脉粥样硬化性心脏病的发生具有保护性作用。
9.疾病因素
 

低HDL-C血症
高HDL-C血症
1.遗传性低HDL-C血症
    Tanger病
    LCAT缺陷症
    ApoAl异常
    家族性高胆固醇血症
    家族性混合性高脂血症
2.急性疾患
    急性心肌梗死
    手术
    烧伤
    急性炎症
3.低脂肪高糖饮食
4.吸烟
5.雌激素减少
6.药物
7.肥胖
8.运动不足
1.原发性
    CETP缺乏症
    HTGL活性低下
    ApoAl合成亢进
    HDL受体异常
    2.继发性
    长期大量饮酒
    原发性胆汁性肝硬化
    CETP活性增加
    HTGL活性减低
    3.药物
    肾上腺皮质激素
    胰岛素
    烟酸及其诱导剂
    雌激素
   HMG-CoA还原酶阻断剂

    【标本要求】
    1.空腹采静脉血3.0ml（血清或肝素锂抗凝血浆）。
    2.全血室温稳定4小时，血浆/血清常温稳定1天，2~8℃稳定7天，-20℃以下可长期保存。
    3.应该避免在过度的肌运动后采血。
    【方法与原理】
    选择性抑制法（PPD法）
   
    上述反应产物紫红色色素在600nm处吸光度增加与HDL-C成正比。
    【仪器】
    Beckman Coulter AU系列自动生化分析仪。
    【试剂】
    1.试剂厂商 日本积水医疗株式会社。
    2.试剂1 0.5mmol/L N，N-=（4-碘丁基）-m-甲苯胺钠；1.0IU/ml胆固醇氧化酶；过氧化物酶；缓冲液（pH6.0）。
    3.试剂2  1.0mmol/L 4-氨基安替比林；胆固醇酯酶；表面活性剂；缓冲液（pH6.0）。
    4.试剂稳定性试剂2~8℃保存至试剂盒标示效期。
    5.质控品 Bio-Rad公司Liquichek脂类控制品，641及642两个水平。
    6.校准品 日本积水医疗株式会社CHOLESTEST N HDL校准液，靶值参见不同批号说明书。
    【参数设置】
    1.Sample vol：2.5μl   Dil vol：0μl   Pre-Dilution Rate：1
    2.Reagent 1 vol：200μl Dil vol：0μl
    3.Reagent 2 vol：67μl Dil vol：0μl
    4.Wavelength Pri：600nm Sec：700nm
    5.Point l Fst：0 Lst：27
    6.Point 2 Fst：0 Lst：10
    7.Method：End Reaction：（+）
    8.Reagent OD Limit First L-2.0 First H 2.5 Last L-2.0 Last H 2.5
    9.Dynamic range：0.039~3.885
    10.Cal type：AB
    11.Correlation factor：See updated information on parameters
    【项目校准】
    1.定期校准：3个月。
    2.更换试剂批号后，应校准。
    3.维护保养后如更换光源、清洗比色杯、清洁光路及仪器光电校正、更换管路等应校准。
    4.质控失控后，在进行其他相应处理后，质控结果仍不满意的，应重新校准。
    【性能参数】
    1.精密度

质控
批内
总
浓度（mmol/L）
SD（mmol/L）
CV%
SD（mmol/L）
CV%
UN1557
1.18
0.01
1.05
0.02
1.39
UE1558
2.51
0.02
0.93
0.08
3.17

    2.检测范围 血清和血浆样本为0.039~3.885mmol/L，当样本浓度超过检测范围上限时，可用0.9%生理盐水或蒸馏水、去离子水稀释2~4倍后重新测定，结果乘以稀释倍数。
    3.干扰 以下几种情况对检测值无显著影响（＜10%）
    抗坏血酸 ≤50mg/dl
    胆红素   ≤50mg/dl
    血红蛋白 ≤500mg/dl
    脂肪乳   ≤5%
    【参考范围】
    本实验室：0.93~1.81mmol/L（36~70mg/dl）。
    单位转换：mg/dl×0.0259=mmol/L
    【临床意义】
    LDL-C是冠心病的危险因素，最常用于判断是否存在患冠心病的危险性，也是血脂异常防治的首要靶标。
    1.LDL-C升高
    （1）血清LDL-C水平随年龄增加而升高。高脂、高热量饮食、运动少和精神紧张等也可使LDL-C水平升高。
    （2） LDL-C升高还可见于家族性高胆固醇血症、家族性ApoB缺陷症、混合性高脂血症、糖尿病、甲状腺功能低下、肾病综合征、梗阻性黄疸、慢性肾衰竭、Cushing综合征、妊娠、多发性肌瘤、某些药物的使用等。
    2.LDL-C降低 可见于家族性无p或低p脂蛋白血症、营养不良、甲状腺功能亢进、消化吸收不良、肝硬化、慢性消耗性疾病、恶性肿瘤、ApoB合成减少等。
    【标本要求】
    1.空腹采静脉血3.0ml（血清或肝素锂抗凝血浆）。
    2.全血室温稳定3小时，血浆/血清常温稳定1天，2~8℃稳定7天，-20℃以下长期保存。
    3.应该避免在过度的肌运动后采血。
    【方法与原理】
    选择性反应法
（第一反应：消除反应，消除LDL以外的胆固醇）
    以上反应产物紫色色素在520nm吸光度增加与LDL-C成正比。
    【仪器】
    Beckman Coulter AU系列自动生化分析仪。
    【试剂】
    1.试剂厂商 日本积水。
    2.试剂1 0.5mmol/L 4-氨基安替比林、1.2U/ml固醇氧化酶、胆固醇酯酶、过氧化物酶、表面活性剂1、缓冲液（pH6.3）。
    3.试剂2 1.0mmol/L N，N-二（4-碘丁基）-m-甲苯胺钠、表面活性剂2、缓冲液（pH6.3）。
    4.试剂稳定性 试剂2~8℃保存至试剂盒标示效期。
    5.质控品 Bio-Rad公司Liquichek脂类控制品，641及642两个水平。
    6.校准品 日本积水公司CHOLESTEST N校准液，靶值参见不同批号说明书。
    【参数设置】
    1.Sample vol：2.5μl   Dil vol：0μl   Pre-Dilution Rate：1
    2.Reagent 1 vol：200μl Dil vol：0μl
    3.Reagent 2 vol：67μl Dil vol：0μl
    4.Wavelength Pri：540nm Sec：660nm
    5.Point 1 Fst：0 Lst：27
    6.Point 1 Fst：0 Lst：10
    7.Method：End Reaction：（+）
    8.Reagent OD Limit：First L-0.2 First H 2.5 Last L-0.2 Last H 2.5
    9.Dynamic range：0.026~11.655
    10.Cal type：AB
    11.Correlation factor：See updated information on parameters
    【项目校准】
    1.定期校准 3个月。
    2.更换试剂批号后，应校准。
    3.维护保养后如更换光源、清洗比色杯、清洁光路及仪器后光电校正、更换管路等应校准。
    4.质控失控后，在进行其他相应处理后，质控结果仍不满意的，应重新校准。
    【性能参数】
    1.精密度

质控
批内
总
浓度（mmol/L）
SD（mmol/L）
CV%
SD（mmol/L）
CV%
UN1557
2.66
0.02
0.71
0.09
3.53
UE1558
4.86
0.04
0.89
0.09
1.82

      2.检测范围 血清和血浆样本为0.026~11.655mmol/L，当样本浓度超过检测范围上限时，可用0.9%生理盐水稀释2~4倍后重新测定，结果乘以稀释倍数。
    3.干扰 以下几种情况对检测值无显著影响（＜10%）
    抗坏血酸≤50mg/dl
    胆红素 ≤20mg/dl
    血红蛋白 ≤500mgldl
    【参考范围】
    本实验室：2.07~3.63mmol/L（80~140mg/dl）。
    单位转换：mg/dl×0.0259=mmol/L
    【临床意义】
    ApoAl为HDL颗粒的主要载脂蛋白，其测定值直接反映HDL-C水平，但脂蛋白中胆固醇含量在病理情况下可发生变化，例如家族性高甘油三酯血症患者HDL-C往往偏低，但ApoAl不一定低，并不增加冠心病危险，因而HDL-C测定不能代替ApoAl。动脉粥样硬化和冠心病患者血中ApoAl多降低，脑血管病时下降更为明显。
    ApoAl降低见于：ⅡA型高脂血症、冠心病、脑血管病、感染、血液透析、慢性肾炎、糖尿病、慢性肝炎、肝硬化、胆汁淤积阻塞、吸烟等。ApoAl缺乏症（如Tanger病）、鱼眼病、家族性LCAT缺乏症、家族性低α脂蛋白血症等患者血清中ApoAl与HDL-C极低。
    ApoAl升高见于：妊娠、雌激素治疗、锻炼、饮酒。
    【标本要求】
    1.空腹采静脉血3.0ml（血清或肝素锂抗凝血浆）。
    2.全血室温稳定3小时，血浆/血清常温稳定1天，2~8℃稳定8天，-20℃稳定2个月，-80℃可长期保持。
    3.应该避免在过度的肌运动后采血。
    【方法与原理】
    1.方法 免疫透射比浊法、终点法。
    2.原理 血清ApoAl与试剂中的特异性抗人ApoA1抗体相结合，形成不溶性抗原一抗体复合物，使反应液产生混浊，在波长340nm下测出吸光度值，代表混浊程度，浊度的高低与血清标本中ApoAl的含量成比例。
    【仪器】
    Beckman Coulter AU系列自动生化分析仪。
    【试剂】
    1.试剂厂商 Roche。
    2.试剂1 TRIS缓冲液：50mmol/L，pH8.0；PEG：3.8%；防腐剂；表面活性剂。
    3.试剂2 抗人ApoAl抗体（羊）；TRIS缓冲液：100mmol/L，pH8.0；防腐剂。
    4.试剂稳定性未开瓶试剂2~8℃保存至试剂盒标示效期，开瓶后上机稳定42天。
    5.质控品 Bio-Rad公司Liquichek脂类控制品，641及642两个水平。
    6.校准品Roche C.f.a.s Lipids多项校准液，靶值参见不同批号说明书。
    【参数设置】
    1.Sample vol：3.0μl   Dil vol：0μl   Pre-Dilution Rate：20
    2.Reagent 1 vol：125μl Dil vol：0μl
    3.Reagent 2 vol：25μl Dil vol：0μl
    4.Wavelength Pri：340nm Sec：700nm
    5.Point Fst：10 Lst：19
    6.Method：End Reaction：（+）
    7.Reagent OD Limit：First L-2   First H 2.5 Last L-2   Last H 2.5
    8.Dynamic range：0.2~4.0
    9.Cal type：5AB
    10.Correlation factor：See updated information on parameters
    【项目校准】
    1.定期校准 3个月。
    2.更换试剂批号后，应校准。
    3.维护保养后如更换光源、清洗比色杯、清洁光路及仪器后光电校正、更换管路等应校准。
    4.质控失控后，在进行其他相应处理后，质控结果仍不满意的，应重新校准。
    【性能参数】
    1.精密度

质控
批内
总
浓度（g/L）
SD（g/L）
CV%
SD（g/L）
CV%
UN1557
1.04
0.001
1.40
0.002
1.45
UE1558
0.98
0.001
1.46
0.001
1.39

    2.检测范围 血清和血浆样本为0.2~4.Og/L，当样本浓度超过检测范围上限时，可用0.9%生理盐水稀释3~5倍后重新测定，结果乘以稀释倍数。
    3.干扰 以下几种情况对检测值无显著影响（＜10%）
    胆红素    ≤1026pLmol/L
    血红蛋白    ≤10.0g/L脂浊度L指数≤1000（高脂样本超过反应允许吸光度时，结果将标记@，
    这时应稀释3~5倍重新测定。）
    【参考范围】
    本实验室：1.0~1.6g/L（100~160mg/dl）。单位转换：mg/dl×0.01=g/L


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