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【医技】检验科医疗诊疗规范——第一篇 临床化学与免疫检验41-50

作者:王泓 日期:2014-06-19

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    【临床意义】
    ApoB主要存在于LDL中，其测定水平直接反映LDL-C水平，但脂蛋白中的胆固醇含量在病理情况下可发生变化，因而LDL-C测定不能代替ApoB。ApoB是各项血脂指标中较好的动脉粥样硬化标志物，其升高是冠心病的危险因素。
    1.ApoB降低
    （1）生理性：锻炼、妊娠等。
    （2）病理性：Ⅰ型高脂血症、肝病、肝硬化、感染、药物治疗、服用雌激素等。
    2.ApoB升高
    主要见于冠心病，Ⅱa、Ⅱb型高脂血症，脑血管病，糖尿病，胆汁梗阻，脂肪肝，血液透析，肾病综合征，慢性肾炎，吸烟等。
    【标本要求】
    1.空腹采静脉血3.0ml（血清或肝素锂抗凝血浆）。
    2.全血室温稳定3小时，血浆/血清常温稳定1天，2~8℃稳定3天，-20℃稳定2个月，-80℃可长期保存。
    3.应该避免在过度的肌运动后采血。
    【方法与原理】
    1.方法 免疫透射比浊法、终点法。
    2.原理 血清ApoB与试剂中的特异性抗人ApoB抗体相结合，形成不溶性抗原一抗体复合物，使反应液产生混浊，在波长340nm下测出吸光度值，代表混浊程度，浊度的高低与血清标本中ApoB的含量成比例。
    【仪器】
    Beckman Coulter AU系列自动生化分析仪。
    【试剂】
    1.试剂厂商 Roche。
    2.试剂1 TRIS缓冲液：50mmol/L，pH8.0；PEG：4.2%；防腐剂；表面活性剂。
    3.试剂2 抗人ApoB抗体（羊）；TRIS缓冲液：100mmol/L，pH8.0；防腐剂。
    4.试剂稳定性 未开瓶试剂2~8℃保存至试剂盒标示效期，开瓶后上机稳定42天。
    5.质控品 Bio-Rad公司Liquichek脂类控制品，641及642两个水平。
    6.校准品 RocheC.f.a.s Lipids多项校准液，靶值参见不同批号说明书。
    【参数设置】
    1.Sample vol：2.0μl   Dil vol：0μl   Pre-Dilution Rate：1
    2.Reagent 1 vol：250μl Dil vol：0μl
    3.Reagent 2 vol：50μl Dil vol：0μl
    4.Wavelength Pri：340nm Sec：700nm
    5.Point Fst：10 Lst：27
    6.Method：End Reaction：（+）
    7.Reagent OD Limit：First L-2   First H 2.5Last L-2   Last H 2.5
    8.Dynamic range：0.2~4.0
    9.Cal type：5AB
    10.Correlation factor：See updated information on parameters
    【项目校准】
    1.定期校准 3个月。
    2.更换试剂批号后，应校准。
    3.维护保养后如更换光源、清洗比色杯、清洁光路及仪器后光电校正、更换管路等应校准。
    4.质控失控后，在进行其他相应处理后，质控结果仍不满意的，应重新校准。
    【性能参数】
    1.精密度

质控
批内
总
浓度（g/L）
SD（g/L）
CV%
SD（g/L）
CV%
UN1557
0.56
0.004
0.71
0.004
0.66
UE15 58
0.57
0.005
0.92
0.008
1.40

    2.检测范围 血清和血浆样本为0.2~4.0g/L，当样本浓度超过检测范围上限时，可用0.9%生理盐水稀释3~5倍后重新测定，结果乘以稀释倍数。
    3.干扰 以下几种情况对检测值无显著影响（＜10%）
    胆红素      ≤1026μmol/L
    血红蛋白    ≤10.0g/L
    脂浊度L 指数≤1000（高脂样本超过反应允许吸光度时，结果将标记@，
    这时应稀释3~5倍重新测定。）
    【参考范围】
    本实验室：0.6~1.0g/L（60~100mg/dl）。
    单位转换：mg/dl×0.01=g/L
    【临床意义】
    在排除各种应激性升高的情况下，Lp（a）在动脉粥样硬化（AS）和血栓形成两者之间起一个桥梁作用，被认为是AS性心脑血管病及周围动脉硬化的一项独立的危险因素。高Lp（a）伴LDL-C增加的冠心病患者心肌梗死发生危险性显著高于LDL-C正常者。血清Lp（a）浓度主要由基因控制，不受性别、年龄、体重、适度体育锻炼和降胆固醇药物的影响。
    1.Lp（a）升高
    （1）缺血性心、脑血管疾病，如高脂血症、动脉粥样硬化、冠心病、脑梗死等。
    （2）外科手术、急性创伤和急性炎症。
    （3）肾病综合征和尿毒症。
    （4）未控制的糖尿病患者、甲状腺功能不全、除肝癌以外的恶性肿瘤。
    2.Lp（a）降低
    （1）甲状腺功能亢进。
    （2）肝脏疾病（慢性肝炎除外）。
    （3）接受雌激素、烟酸、新霉素治疗的患者。
    【标本要求】
    1.空腹采静脉血3.0ml（血清或肝素锂抗凝血浆）。
    2.全血室温稳定3小时，血浆/血清常温稳定1天，2~8℃稳定3天，-20℃可稳定2个月，-80℃可长期保存。
    3.应该避免在过度的肌运动后采血。
    【方法与原理】
    1.方法 胶乳凝集比浊法、终点法。
    2.原理血清（血浆）中的脂蛋白（a）[Lp（a）]与鼠抗人脂蛋白（a）单克隆抗体胶乳增强颗粒反应，形成凝集块，根据对凝集反应的浊度变化的光学测定，求出脂蛋白（a）浓度。
    Lp（a）+鼠抗人脂蛋白（a）单克隆抗体胶乳增强颗粒——抗原抗体反应引起的凝集。
    【仪器】
    Beckman Coulter AU系列自动生化分析仪。
    【试剂】
    1.试剂厂商 日本积水医疗株式会社。
    2.试剂1缓冲液，50mmol/L甘氨酸缓冲液。
    3.试剂2胶乳液，1.6mglml鼠抗人脂蛋白（a）单克隆抗体胶乳增强颗粒。
    4.试剂稳定性试剂2~10℃保存至试剂盒标示效期，开封后2~10℃保存30天。
    5.质控品 Bio-Rad公司Liquichek脂类控制品，641及642两个水平。
    6.校准品 日本积水医疗株式会社Lp（a） Latex校准液，靶值参见不同批号说明书。
    【参数设置】
    1.Sample vol：3.0μl Dil vol：0μl Pre-Dilution Rate：1
    2.Reagent 1 vol：180μl Dil vol：0μl
    3.Reagent 2 vol：60μl  Dilvol：0μl
    4.Wavelength Pri：600nm Sec：None
    5.Point Fst：14 Lst：27
    6.Method：FIXED Reaction：（+）
    7.Reagent OD Limit：First L-2 First 2.5 Last L-2 Last H 2.5
    8.Dynamic range：0~1000
    9.Cal type：4AB
    10.Correlation factor：See updated information on parameters
    【项目校准】
    1.定期校准 3个月。
    2.更换试剂批号后，应校准。
    3.维护保养后如更换光源、清洗比色杯、清洁光路及仪器后光电校正、更换管路等应校准。
    4.质控失控后，在进行其他相应处理后，质控结果仍不满意的，应重新校准。
    【性能参数】
    1.精密度（厂家）批内CV≤5.0%；批间CV≤10.0%。
    2.检测范围 血清和血浆样本为0~1000mg/L，当样本浓度超过检测范围上限时，可用0.9%生理盐水稀释3~5倍后重新测定，结果乘以稀释倍数。
    3.干扰 以下几种情况对检测值无显著影响
    胆红素 ≤20mg/dl
    血红蛋白 ≤500mg/dl
    高脂样本超过反应允许吸光度时，结果将标记@，这时应稀释3~5倍重新测定，结果乘以稀释倍数。
    【参考范围】
    本实验室：0~300mg/L。
    【临床意义】
    1.组织损伤，如大手术，严重创伤、烧伤、心肌梗死等，hsCRP常于发病后数小时迅速升高，病变好转时迅速下降。若手术恢复后又升高，提示继发感染或深静脉血栓形成。
    2.各种细菌感染，特别是革兰阴性杆菌感染，hsCRP常明显升高；而病毒性感染，hsCRP升高不明显或轻度升高，或作为细菌性感染和病毒性感染的鉴别诊断指标。
    3.风湿热活动期，hsCRP明显升高，而治疗好转后，逐渐降至正常。
    4.恶性肿瘤，器官移植后发生排斥反应，以及妊娠等都可见hsCRP明显升高。
    5.健康人hsCRP反复高于3mg/L是心脑血管疾病的危险因素。
    【标本要求】
    1.空腹采静脉血3.0ml（血清或肝素锂抗凝血浆）。
    2.血浆/血清常温稳定11天，2~8℃稳定2个月，- 20℃稳定6个月，-80℃可长期保存。
    3.应该避免在过度的肌运动后采血。
    【方法与原理】
    1.方法 免疫透射比浊法、终点法。
    2.原理 样品中的CRP与吸附于胶乳颗粒上的抗人CRP抗体发生特异性反应并生成不溶性聚集物。这些聚集物的吸光度与样品中CRP的浓度成正比。
    【仪器】
    Beckman Coulter AU系列自动生化分析仪。
    【试剂】
    1.试剂厂商 Beckman Coulter。
    2.试剂1 100mmol/L氨基乙酸缓冲液。
    3.试剂2 胶乳，吸附有抗CRP抗体，≈0.5%w/v。
    4.试剂稳定性 未开瓶试剂2~8℃保存至试剂盒标示效期，开瓶后存放在分析仪试剂仓中的试剂在60天内性质稳定。
    5.质控品 Bio-Rad公司Liquichek脂类控制品，641及642两个水平；Liquichek免疫控制品，596一个水平。
    6.校准品 Beckman Coulter公司hsCRP校准液，靶值参见不同批号说明书。
    【参数设置】
    1.Sample vol：3.5μl   Dil vol：0μl   Pre-Dilution Rate：1
    2.Reagent 1 vol：70μl Dil vol：0μl
    3.Reagent 2 vol：70μl Dil vol：10μl
    4.Wavelength Pri：570nm
    5.Point Fst：12 Lst：22
    6.Method：fixed Reaction：（+）
    7.Reagent OD Limit：First L-0.1 First H 2.5 Last L-0.1 Last H 2.5
    8.Dynamic range：0.08~80
    9.Cal type：6AB
    10.Correlation factor：See updated information on parameters
    【项目校准】
    1.定期校准 3个月。
    2.更换试剂批号后，应校准。
    3.维护保养后如更换光源、清洗比色杯、清洁光路及仪器后光电校正、更换管路等应校准。
    4.质控失控后，在进行其他相应处理后，质控结果仍不满意的，应重新校准。
    【性能参数】
    1.精密度

质控
批内
总
浓度（mg/L）
SD（mg/L）
CV%
SD（mg/L）
CV%
0.23
0.01
5.73
0.01
5.76
48.28
0.35
0.73
0.73
1.50
153.18
1.51
0.98
2.67
1.74

    2.检测范围 血清和血浆样本为0.08~80.00mg/L。当样本浓度超过检测范围上限时，可用0.9%生理盐水稀释2~10倍后重新测定，结果乘以稀释倍数。
    3.干扰 以下几种情况对检测值无显著影响（＜10%）
    胆红素    ≤684μmol/L
    血红蛋白 ≤5g/L
    甘油三酯 ≤11.3mmol/L（高脂样本超过反应允许吸光度时，结果将标记@，
    这时应15 000转高速离心15分钟后，取下层清亮液体测定。）
    【参考范围】
    本实验室：0.0~3.0mg/L。
    【临床意义】
    血中FFA水平容易受各种因素的影响而变动，所以不能凭一次检测结果作诊断，要对FFA的水平做连续的动态监测。FFA主要与糖尿病、冠心病、糖尿病性心肌病、高血压、肾病等相关。
    1.FFA升高 主要见于糖尿病、甲状腺功能亢进、肢端肥大症、库欣病、肥胖、重症肝疾患、褐色细胞瘤、急性胰腺炎等。
    2.FFA降低 见于甲状腺功能低下、胰岛素瘤、脑垂体功能减低、艾迪生病等。
    【标本要求】
    1.空腹采静脉血3.0ml（血清或肝素锂抗凝血浆）。
    2.血浆/血清常温稳定1天，2~8℃稳定3天，-20℃稳定1周。
    3.应该避免在过度的肌运动后采血。
    【方法与原理】
    1.方法 酶法、终点法。
    2.原理
   
    【仪器】
    Beckman Coulter AU系列自动生化分析仪。
    【试剂】
    1.试剂厂商 日本积水医疗株式会社。
    2.试剂1 酶品 42.5U/50ml酰基辅酶A合成酶、10.9mg/50ml 4-氨基安替比林，抗坏血酸氧化酶，辅酶A，腺苷三磷酸钠，氯化镁。
    3.试剂1溶解液 2-氨基-2-羟甲基-1，3-丙二醇缓冲液，100mmol/L。
    4.试剂2酶品 酰基辅酶A氧化酶532.8U/100ml，过氧化物酶。
    5.试剂2溶解液 DSBmT 1mmol/L，NH乙基顺丁烯二酰亚胺。
    6.试剂配制 用FFA溶解液1溶解FFA酶品1后使用；用FFA溶解液2溶解FFA酶品2后使用。
    7.试剂稳定性 试剂2~8℃保存至试剂盒标示效期，配制后，在2~8℃避光保存下7日有效。
    8.质控品 Bio-Rad公司Liquichek脂类控制品，641及642两个水平。
    9.校准品 日本积水医疗配套校准液，靶值参见不同批号说明书。
    【参数设置】
    1.Sample vol：5.0μl   Dil vol：0μl   Pre-Dilution Rate：1
    2.Reagent 1 vol：100μl   Dil vol：0μl
    3.Reagent 2 vol：200μl Dil vol：0μl
    4.Wavelength Pri：540nm Sec：660nm
    5.Point 1 Fst：0 Lst：27
    6.Method：End Reaction：（+）7.Reagent OD Limit：FirstL-0， 2   First H 2.5   Last L-0.2   Last H 2.5
    8.Dynamic range：10~3000
    9.Cal type：AB
    10.Correlation factor：See updated information on parameters
    【项目校准】
    1.定期校准 3个月。
    2.更换试剂批号后，应校准。
    3.维护保养后如更换光源、清洗比色杯、清洁光路及仪器光电校正、更换管路等应校准。
    4.质控失控后，在进行其他相应处理后，质控结果仍不满意的，应重新校准。
    【性能参数】
    1.精密度

    质控
批内
总
SD （μ.mol/L）
CV%
SD（μmol/L）
CV%
LEVEL LOW
2.23
0.4
4.32
0.8
LEVEL HIGH
5.34
0.5
21.23
1.9

    2.检测范围 10~3000μmol/L。
    3.干扰 以下几种情况对检测值无显著影响（＜10%）
    抗坏血酸≤50mg/dl
    胆红素 ≤5mg/dl
    【参考范围】
    本实验室：129~769μmol/L。
    【临床意义】
    LIP活性升高见于：
    1.急性胰腺炎、慢性胰腺炎急性期、阻塞性胰腺炎急性期：脂肪酶在发病后5~6小时升高，急性胰腺炎，胆石症可持续3~6天，慢性胰腺炎复发时持续2周，阻塞性和酒精诱发的慢性胰腺炎则持续更长。
    2.急性上腹部综合征 累及胰腺的高脂肪酶血症病例（十二指肠溃疡穿孔、胆囊炎、肠梗阻）。
    3.ERCP 造影后脂肪酶立即升高，6小时后达最大值，持续3天。
    4.肾功能不全 部分血清肌酐＞2652μlmol/L的肾功能不全患者可有脂肪酶升高。
    5.其他疾病 糖尿病酮症酸中毒、病毒性肝炎、流行性腮腺炎、肠伤寒和肉样瘤病变累及胰腺时，脂肪酶轻微升高。
    【标本要求】
    1.空腹采静脉血3.0ml（血清或肝素锂抗凝血浆）。
    2.全血室温稳定2小时，血浆/血清常温稳定7天，2~8℃稳定3周，-20℃和-80℃稳定数月。
    3.应该避免溶血和细菌污染。
    检测系统1：Beckman Coulter UniCel
    【方法与原理】
    1.方法 酶法、速率法。
    2.原理
    1，2-二酰甘油酯+H2O→2-单酰甘油酯十脂肪酸（LIP催化）
    2-单酰甘油酯+H2O→甘油十脂肪酸（MGLP催化）
    甘油+ATP→3-磷酸甘油+ADP（GK催化）
    3-磷酸甘油+O2→磷酸二羟丙酮+H2O2（GPO催化）
    2H2O2+4-APP+TOOS→醌亚胺（有色物质）+4H2O（HPO催化）
    【仪器】
    Beckman Coulter UniCel iclass系列生化免疫分析仪。
    【试剂】
    1.试剂厂商 Beckman Coulter。
    2.试剂 每套试剂包括3瓶干粉状酶底物；3瓶10ml的脂肪酶稀释液；3瓶脂肪酶试剂船，各含有3.5ml脂肪酶活化液（C隔室）；1瓶干粉状校准物，两个淀粉酶试剂盒（2×200人份），货号465101。成分：1，2-二酰甘油酯0.80mmol/L，单酰甘油酯脂肪酶（产自微生物体）627U/L，ATP 0.48mmol/L，甘油激酶（产自微生物体）0.98KU/L，3-磷酸甘油氧化酶（产自微生物体）29.1KU/L，4-APP l.54mmol/L，N-乙基-N-（2-羟基-3-磺丙基）-m-甲苯胺蓝1.5mmol/L，辣根过氧化物酶0.98KU/L。
    3.试剂稳定性 密封贮存于2~8℃至标注的有效期，开瓶后在仪器内可稳定14天（有效期内）。
    4.质控品 Bio-Rad公司Liquichek人血清不定值临床化学控制品，691及692两个水平。
    5.校准品 Beckman Coulter SYNCHRON系统脂肪酶校准品（试剂盒内），靶值参见不同批号说明书。
    【参数设置】
    1.标本量：4μl
    2.试剂总量：270（试剂B：200μl，试剂C： 70μl）
    3.测定方式：RATE-1
    4.波长：560nm
    5.测试温度：37℃
    6.测试时间：共490秒，读点时间380~490秒
    【项目校准】
    1.定期校准 5天。
    2.更换试剂批号后，应校准。
    3.仪器更换光源和（或）更换主要备件后应重新校准。
    4.质控失控后，在进行其他相应处理后，质控结果仍不满意的，应重新校准。
    【性能参数】
    1.精密度

质控
批内
总
浓度（U/L）
SD（U/L）
CV%
SD（U/L）
CV%
16391
29.6
1.3
4.4
1.9
5.7
16392
59.7
1.0
1.7
1.1
1.9

    2.检测范围 5~600U/L，当样品中的脂肪酶的活性超出系统的测试线性范围，可用生理盐水（或试剂级别的水）进行稀释，将结果乘以稀释倍数就得到原始样品中脂肪酶浓度。
    3.干扰 明显溶血标本不能使用，溶血标本会造成结果假性升高，肉眼脂血标本应高速离心（15 000rpm×15min）后，取下层清亮血清检测。
    【参考范围】
    本实验室：7~58U/L。
    检测系统2：Siemens Dimension
    【方法与原理】
    1.方法 酶法、速率法。
   2.原理
        反应的终产物甲基试卤灵在577nm吸光度变化速率与LIP活性成正比。
    【仪器】
    Siemens Dimension系列生化分析仪。
    【试剂】
    1.试剂厂商 Siemens。
    2.试剂 试剂船1~3孔（片剂）：0.24mmol/L的脂肪酶底物，10mmol/L胆盐，1.6mmol/L酒石酸钠钾缓冲液CNPG3，终末反应浓度为1.24mmol/L；4~6孔（片剂）：50mmol/L Tris缓冲液，2.0mmol/L CaCl2，2.8×105 U/L脂肪酶辅酶。7、8孔（液体）：0.53mol/L NaOH。
    3.试剂稳定性 未开封试剂盒2~8℃保存可稳定至效期；在仪器中，未打孔或未水化试剂稳定30天，1~6孔打孔后稳定48小时，7、8孔打孔后稳定30天。
    4.质控品 Bio-Rad公司Liquichek人血清不定值临床化学控制品，691及692两个水平。
    5.校准品 Siemens脂肪酶校准品（Cat.No.DC15A），靶值参见不同批号说明书。
    【参数设置】
    1.Sample vol：4μl
    2.Reagent 1 vol：100μl
    3.Reagent 2 vol：100μl Dil vol：216μl
    4.Wavelength Pri：577nm Sec：700nm
    5.Method：rate Reaction：（+）
    6.Dynamic range：50~1500
    【项目校准】
    1.更换试剂批号后需校准；同一批号试剂使用3个月后需校准。
    2.维护保养如更换光源、清洗比色杯、清洁光路、更换管路等之后需校准。
    3.质控失控后，在进行其他相应处理后，质控结果仍不满意需重新校准。
    4.特殊情况校准要求参见仪器操作维护手册及试剂说明书。
    【性能参数】
    1.精密度

    浓度（U/L）
批内
总
SD（U/L）
CV%
SD（U/L）
CV%
水平1
107
1.8
1.6
6.3
5.9
水平2
825
6.9
0.8
33.0
4.0

    2.检测范围 50~1500U/L。若样品中LIP浓度大于1500U/L，需用生理盐水稀释2~20倍后检测，结果乘以稀释倍数。
    3.干扰 Bil≤342μmol/L，TG≤11.4mmol/L，Hb≤5g/L对结果无显著影响（＜10%）（高脂样本超过反应允许吸光度，仪器报警“abnormal reaction”，这时应15 000转高速离心15分钟后，取下层清亮液体测定。）
    【参考范围】
    本实验室：114~330U/L。
    【临床意义】
    1.淀粉酶活性升高可见于：
    （1）急性胰腺炎和慢性胰腺炎急性发作、阻塞性慢性胰腺炎：症状开始后5~6小时，淀粉酶明显升高，持续2~5天（急性胰腺炎）、＞6天（慢性胰腺炎复发），甚至持续数周（阻塞性和酒精诱发的慢性胰腺炎），上述疾病可出现淀粉酶反复升高。淀粉酶的最高值可见于急性浆液性炎症，与预后无关。
    （2）其他急性上腹痛：胆囊炎、十二指肠溃疡穿孔、肠梗阻症状出现5~6小时后淀粉酶可明显升高，并持续2~4天。异位妊娠破裂、卵巢肿瘤扭转、腹膜炎、肠静脉坏死和脾静脉血栓可有淀粉酶轻度升高。
    （3）腮腺炎：淀粉酶升高程度较小，但流行性腮腺炎可有明显升高，脂肪酶不升高。
   （4） ERCP术后：2小时可升高，6小时达高峰，可持续2~3天。
    （5）其他疾病：酒精中毒、肿瘤、肾功能不全、病毒性肝炎、AIDS、伤寒、肉样瘤病、上腹部创伤等均有可能引起淀粉酶轻度升高。
    2.淀粉酶活性降低可见于：肝硬化、肝功能衰竭等。
    【标本要求】
    1.空腹采静脉血3.0ml（血清或肝素锂抗凝血浆）。
    2.全血室温稳定2小时，血浆/血清常温稳定7天，2~8℃稳定6个月，-20℃和-80℃长期稳定。
    3.应该避免溶血，注意避免唾液的污染，否则将引起假阳性。
    检测系统1：Beckman Coulter UIuCel
    【方法与原理】
    1.方法 酶法、速率法。
    2.原理 淀粉酶催化麦芽四糖水解为麦芽糖，生成麦芽糖的速率是通过麦芽糖磷酸化酶、β-磷酸葡萄糖变位酶以及葡萄糖-6-磷酸脱氢酶所催化的关联反应来算得。该关联反应导致氧化型β-烟酰胺腺嘌呤二核苷酸（NAD）被还原为NADH，导致340nm波长下吸光度发生变化，该波长下吸光度的增加与样品中淀粉酶活性成正比。
   
    【仪器】
    Beckman Coulter UniCel iclass系列生化免疫分析仪。
    【试剂】
    1.试剂厂商 Beckman Coulter。
    2.试剂 每套试剂包括两个淀粉酶试剂盒（2×200人份），货号442775。成分：麦芽四糖7.9mmol/L，NAD 3.0mmol/L，麦芽糖磷酸化酶5.5KIU/L，β-磷酸葡萄糖变位酶1.8KIU/L，葡萄糖-6-磷酸脱氢酶5.5KIU/L，还包含一些不参与反应的成分用于保证试剂的最佳性能。
    3.试剂稳定性密封贮存于2~8℃至标注的有效期，开瓶后在仪器内可稳定30天（有效期内）。不可冻存。
    4.质控品 Bio-Rad公司Liquichek人血清不定值临床化学控制品，691及692两个水平。
    【参数设置】
    1.标本量：12μl
    2.试剂总量：250（试剂A：238μl，试剂C：12μl）
    3.测定方式：RATE-1
    4.波长：340nm
    5.测试温度：37℃
    6.测试时间：共260秒，读点时间200~260秒
    【性能参数】
    1.精密度

质控
批内
总
浓度（U/L）
SD（U/L）
CV%
SD（U/L）
CV%
16391
91
0.7
0.8
0.7
0.8
16392
208
1.3
0.6
1.3
0.6

    2.检测范围 5~800U/L，当样品中的淀粉酶的活性超出系统的测试线性范围，可用生理盐水（或试剂级别的水）进行稀释，将结果乘以稀释倍数就得到原始样品中淀粉酶浓度。
    3.干扰 明显溶血标本不能使用，溶血标本会造成结果假性升高，肉眼脂血标本应15 000转高速离心15分钟后，取下层清亮液体测定。
    检测系统2：Siemens Dimension
    【方法与原理】
    1.方法 酶法、速率法。
    2.原理
   
    CNPG2：2-氯-4-硝基苯酚-α-麦芽糖苷，G3：α-麦芽糖三糖苷，Glu：葡萄糖
    反应最后生成CNP产生吸光度变化，在405nm和577nm双波长测定吸光度变化速率。
    【仪器】
    Siemens Dimension系列全自动生化分析仪。
    【试剂】
    1.试剂厂商 Siemens。
    2.试剂 试剂船1~6孔为液体CNPG3，反应体系浓度为1.24mmol/L。
    3.试剂稳定性 未开封试剂盒2~8℃保存可稳定至效期；在仪器中，未打孔或未水化试剂稳定30天，打孔后稳定72小时。
    4.质控品 Bio-Rad公司Liquichek人血清不定值临床化学控制品，691及692两个水平。
    5.校准品 Siemens公司Enzyme Verifier（Cat.No.DC19），靶值参见不同批号说明书。
    【参数设置】
    1.Sample vol：14μl Auto Dilute vols：2μl
    2.Reagent 1 vol：220μl Dil vol：166μl
    3.Wavelength Pri：405nm Sec：577nm
    4.Dynamic range：0~650
    【项目校准】
    1.更换试剂批号后需校准，Verify方式。
    2.维护保养如更换光源、清洗比色杯、清洁光路、更换管路等之后需校准，Verify方式。
    3.特殊情况校准要求参见仪器操作维护手册及试剂说明书。
    【性能参数】
    1.精密度

    浓度（U/L）
批内
总
SD（U/L）
CV%
SD（U/L）
CV%
水平1
50
0.4
0.81
0.68
1.36
水平2
408
1.1
0.27
3.25
0.80

    2.检测范围 0~650U/L。当样本浓度超过检测范围上限时，可用0.9%生理盐水稀释2~10倍后重新测定，结果乘以稀释倍数。
    3.干扰 Bil≤342μmol/L，TG≤11.4mmol/L，Hb≤5g/L对结果无显著影响（＜10%）（高脂样本超过反应允许吸光度，仪器报警“abnormal reaction”，这时应15 000转高速离心15分钟后，取下层清亮液体测定。）
    【参考范围】
    本实验室：0~125U/L。
    【临床意义】
    血氨升高可见于：
    1.继发性疾病 肝性脑病、大剂量化疗、多发性骨髓瘤（以累及脑膜的患者多见）、Reye综合征、丙戊酸治疗（多为一过性）、尿路感染、低体重新生儿、新生儿短暂性高血氨等。
    2.原发性（遗传性）疾病 尿素循环缺陷、氨基酸血症、脂肪酸氧化障碍、丙酮酸代谢障碍等。
    【标本要求】
    1.空腹真空采静脉血充满血氨检测专用试管（4.0ml肝素锂抗凝血）。
    2.采血后勿打开管盖，送检时温度超过20℃应置于冰水中保存。尽快离心分离血浆，30分钟内完成测定。2~8℃稳定2小时，-20℃稳定24小时。
    3.应该避免溶血。
    【方法与原理】
    1.方法谷氨酸脱氢酶法、速率法。
    2.原理
   
    a-KG：α-酮戊二酸；GLDH：谷氨酸脱氢酶；NADPH：还原型磷酸辅酶A；NADP：氧化型磷酸辅酶A
    上述酶偶联反应中NADPH在340nm吸光度下降的速率与样本中氨的含量成正比。
    【仪器】
    Siemens Dimension系列全自动生化分析仪。
    【试剂】
    1.试剂厂商 Siemens。
    2.试剂 试剂船1、2、3孔中为片剂，NADPH：0.25mmol/L（反应体系浓度，下同），α-KG：4.67mmol/L，激活剂，缓冲液；4、5、6孔中为液体，GLDH：10.8U（来自牛肝）。
    3.试剂稳定性 未开封试剂盒2~8℃保存可稳定至效期；在仪器中，未打孔或未水化试剂稳定30天，打孔后稳定72小时。
    4.质控品 Bio-Rad公司Ethanol/Ammonia临床化学控制品，544及546两个水平。
    5.校准品 Siemens AMON校准品（Cat.No.DC25），靶值参见不同批号说明书。
    【参数设置】
    1.Sample vol：53μl
    2.Reagent l vol：155μl
    3.Reagent 2 vol：50μl Dil vol：92μl
    4.Wavelength Pri：340nm Sec：383nm
    5.Method：Bichromatic rate
    6.Dynamic range：0~1000
    【项目校准】
    1.更换试剂批号后需校准；同一批号试剂使用3个月后需校准。
    2.维护保养如更换光源、清洗比色杯、清洁光路、更换管路等之后需校准。
    3.质控失控后，在进行其他相应处理后，质控结果仍不满意需重新校准。
    4.特殊情况校准要求参见仪器操作维护手册及试剂说明书。
    【性能参数】
    1.精密度

    浓度（μmol/L）
批内
总
SD（μmol/L）
CV%
SD（μmol/L）
CV%
水平1
113
3.7
3.3
5.9
5.2
水平2
292
4.7
1.6
7.9
2.7

    2.检测范围 0~1000μmol/L。若血浆氨浓度大于1000μmol/L，常由疾病外的其他原因引起，应特别注意。
    3.干扰 Bil≤342μmol/L、TG≤6.86mmol/L对检测无显著影响（＜10%）。不能使用溶血标本。
    【参考范围】
    本实验室：11~35μmol/L。
    【临床意义】
    1.血乳酸升高
    （1）导致高乳酸血症的潜在原因和疾病：高强度的运动、癫痫大发作、输入过量碱或碳水化合物（如葡萄糖）或儿茶酚胺、使用大剂量胰岛素、肺换气过度等。
    （2）高乳酸血症常转变为乳酸酸中毒的有：糖尿病酮症酸中毒、休克、败血症、肠梗阻、心肌梗死、急性肝功能衰竭、2型糖尿病双胍类药物治疗性乳酸酸中毒、急性腹腔血管栓塞术后、胎儿窘迫、CO中毒、急性酒精中毒、重度急性贫血、恶性肿瘤、感染等。
    （3）遗传性疾病：线粒体肌病、糖原贮积病如McArdle病、一些代谢酶的缺陷病（如6-磷酸葡萄糖酶、1，6二磷酸果糖酶、丙酮酸羧化酶）等。
    2.脑脊液乳酸升高
    （1）脑缺血、癫痫。
    （2）检测脑脊液乳酸水平有助于多种脑膜炎的鉴别诊断。
    【标本要求】
    1.空腹并充分休息后采静脉血2.5ml（氟化钠/草酸钾抗凝血浆）。脑脊液标本用常规方法采集1ml。
    2.采血后于1小时内分离血浆，避免溶血，尽快测定。血浆或脑脊液标本常温稳定4小时，2~8℃稳定24小时，- 20℃稳定1个月，- 80℃稳定更长时间。
    3.应该避免在过度的肌运动后采血（功能实验除外）。
    【方法与原理】
    1.方法酶法（L→P）、终点法。
    2.原理
   
    上述反应中NADH在340nm处吸光度的增加与样本中乳酸的含量成正比。
    【仪器】
    Siemens Dimension系列全自动生化分析仪。
    【试剂】
    1.试剂厂商 Siemens。
    2.试剂试剂船1、2孔（药片）：2.0μmol/LNAD（反应体系浓度，下同）；3、4孔（液体）：3.7μmol/L硫酸二肼溶液；5、6孔（液体）：40U LDH；7、8孔（液体）：0.24mmol/L Tris缓冲液。
    3.试剂稳定性 未开封试剂盒2~8℃保存可稳定至效期；在仪器中，未打孔或未水化试剂稳定30天，打孔后稳定5天。
    4.质控品 Bio-Rad公司Liquichek人血清未定值临床化学控制品，691及692两个水平。
    5.校准品 Siemens公司CHEM1多项校准品（Cat NO.DC18A），靶值参见不同批号说明书。
    【参数设置】
    1.Sample vol：4μl
    2.Reagent l vol：158μl
    3.Reagent 2 vol：20μl
    4.Reagent 3 vol：75μl
    5.Reagent 4 vol：20μl
    6.Dil vol：197μl
    7.Wavelength Pri：340nm Sec：383nm
    8.Method：end
    9.Dynamic range：0.3~15
    【项目校准】
    1.更换试剂批号后需校准；同一批号试剂使用3个月后需校准。
    2.维护保养如更换光源、清洗比色杯、清洁光路、更换管路等之后需校准。
    3.质控失控后，在进行其他相应处理后，质控结果仍不满意，需重新校准。
    4.特殊情况校准要求参见仪器操作维护手册及试剂说明书。
    【性能参数】
    1.精密度

    浓度（mmol/L）
批内
总
SD（mmol/L）
CV%
SD（mmol/L）
CV%
水平1
3.2
0.09
2.8
0.1
3.2
水平2
10.4
0.16
1.6
0.20
1.9

    2.检测范围 0.3~15.Ommol/L。若样品中乳酸浓度大于15.0mmol/L，由仪器自动稀释重测，结果自动乘以稀释倍数。若低于0.3mmol/L，则报告“＜0.3mmol/L”。
    3.干扰 Bil≤359μmol/L； TG≤11.3mmol/L对检测值无显著影响（＜10%）。不能使用肉眼溶血标本。
    【参考范围】
    本实验室：0.4~2.0mmol/L（静脉血浆）。
    新生儿：0.27~2.20mmol/L（静脉血浆）。
    脑脊液：1.1~2.1mmol/L。
    【临床意义】
    脑脊液蛋白含量升高见于：
    1.中枢神经系统炎症 如化脓性脑膜炎、结核性脑膜炎时蛋白明显增加；病毒性脑膜炎为轻度升高；脊髓灰质炎、流行性乙型脑炎、梅毒性中枢神经系统疾患亦升高。
    2.出血 如脑及蛛网膜下腔出血、外伤性血液混入脑脊液时，蛋白也明显升高。
    3.肿瘤 中枢神经系统恶性肿瘤及其转移癌时亦升高。
    4.椎管内梗阻如脊髓肿瘤、蛛网膜下腔粘连、梗阻等可使蛋白明显升高。
    【标本要求】
    1.腰椎穿刺采集脑脊液1ml。
    2.脑脊液常温保存稳定1天，2~8℃稳定3天，-20℃稳定6个月，-80℃长期稳定。
    3.应注意避免血浆蛋白污染及溶血。
    【方法与原理】
    1.方法 邻苯酚红比色法、终点法。
    2.原理 样本中的蛋白与邻苯三酚红（PR）和钼酸盐（Mo）形成在600nm有最大吸光度的紫色复合物。
   
    PR-Mo-蛋白复合物在600nm处吸光度的增加与样本中蛋白含量成正比。
    检测系统1：Beckman Coulter UniCel
    【仪器】
    Beckman Coulter UniCel iclass系列生化免疫分析仪。
    【试剂】
    1.试剂厂商 Beckman Coulter。
    2.试剂 每套试剂包括两个微量蛋白试剂盒（2×50人份），货号445860。成分：邻苯三酚红0.058mmol/L，钼酸钠0.12mmol/L，还包含一些不参与反应的成分用于保证试剂的最佳性能。
    3.试剂稳定性2~8℃密封保存至效期。开瓶后在仪器内可稳定30天（效期内），不可冻存。
    4.质控品 Bio-Rad公司Liquichek脑脊液专项质控，751及752两个水平。
    5.校准品 Beckman Coulter M-TP CAL校准液，货号445930，靶值参见不同批号说明书。
    【参数设置】
    1.标本量：5μl
    2.试剂总量：300μl（试剂B 300μl）
    3.测定方式：EP-2
    4.波长：600nm
    5.测试温度：37℃
    6.测试时间：共270秒，读点时间240~270秒
    【项目校准】
    1.定期校准 14天。
    2.更换试剂批号后，应校准。
    3.仪器更换光源和（或）更换主要备件后应重新校准。
    4.质控失控后，在进行其他相应处理后，质控结果仍不满意的，应重新校准。
    【性能参数】
    1.精密度 批内＜4.0%，批间＜6.0%。

质控
批内
总
浓度（g/L）
SD（g/L）
CV%
SD（glL）
CV%
55341
0.37
0.007
1.9
0.01
3.1
55342
1.02
0.006
0.6
0.03
3.4

    2.检测范围 0.06~3g/L，当样品中蛋白的含量超出系统的测试线性范围，可用生理盐水（或试剂级别的水）稀释后重新测定，将测试结果乘以稀释倍数就得到原始样品中蛋白的浓度。
    3.干扰 明显溶血的样本不能用，含轻链的样本会造成结果假性降低。
    检测系统2：Siemens Dimension
    【仪器】
    Siemens Dimension系列全自动生化分析仪。
    【试剂】
    1.试剂厂商 Siemens。
    2.试剂试剂船1~5孔中（液体）：0.20mmol/L邻苯三酚红甲醇溶液（反应体系浓度，下同），0.35mmol/L钼酸钠，稳定剂，表面活性剂。试剂船7、8孔：0.5mol/L NaOH。
    3.试剂稳定性 未开封试剂盒2~8℃保存可稳定至效期；在仪器中，未打孔或未水化试剂稳定30天，打孔后稳定5天。
    4.质控品 Bio-Rad公司Liquichek脑脊液专项质控，751及752两个水平。
    5.校准品 Siemens UP/CFP校准品（Ca.No.DC45），靶值参见不同批号说明书。
    【参数设置】
    1.Sample vol：10μl
    2.Reagent 1 vol：350μl Dil vol：50μl
    3.Wavelength Pri：600nm Sec：700nm
    4.Method：end
    5.Dynamic range：0.06~2.5
    【项目校准】
    1.更换试剂批号后需校准；同一批号试剂使用2个月后需校准。
    2.维护保养如更换光源、清洗比色杯、清洁光路、更换管路等之后需校准。
    3.质控失控后，在进行其他相应处理后，质控结果仍不满意需重新校准。
    4.特殊情况校准要求参见仪器操作维护手册及试剂说明书。
    【性能参数】
    1.精密度

浓度（g/L）
批内
总
SD（g/L）
CV%
SD（g/L）
CV%
水平1
0.27
0.006
2.2
0.013
5.0
水平2
1.42
0.009
0.6
0.012
0.9

    2.检测范围 0.06~2， 5g/L。若样本中蛋白浓度大于2.5g/L，可用生理盐水稀释2~3倍后重新测定，结果乘以稀释倍数。
    3.干扰 Bil≤342μmol/L； Cr≤2652μmol/L，EDTA≤lg/L对检测值无显著影响（＜10%）。不能使用血浆蛋白污染及溶血标本。含氨基羟丁基卡那霉素A、庆大霉素、卡那霉素、妥布霉素可使结果假性升高，应避免使用含此类物质的标本。
    【参考范围】
    本实验室：0.15~0.45g/L。
    【临床意义】
    CK总活性升高可见于：
    1.心肌损伤 急性心肌梗死，胸痛发作4~6小时升高，约24小时达峰值，48~72小时恢复正常。心内膜炎、心绞痛、心脏介入诊断或治疗手术、心力衰竭等；病毒性心肌炎时CK明显升高。
    2.骨骼肌损伤 急、慢性肌肉损伤，体育活动后，肌内注射，动脉栓塞，外科手术，各型肌炎。
    3.先天性肌病 肌营养障碍如杜氏肌营养不良症，先天性肌强直症（Thomsen病），重症肌无力，脊柱强直症。
    4.继发性肌损伤 甲亢、低钾血症、甲减、中毒、癫痫等。
    【标本要求】
    1.空腹采静脉血3.0ml（血清/肝素锂抗凝血浆）。
    2.血清/血浆标本2~8℃稳定3天，-20℃稳定1个月。
    3.运动可引起CK升高，应注意鉴别。
    检测系统l：Beckman Coulter AU
    【方法与原理】
    1.方法 IFCC推荐的酶法、速率法。
    2.原理
   
    上述反应中NADPH在340nm处吸光度变化的速率与CK活性成正比。
    【仪器】
    Beckman Coulter AU系列自动生化分析仪。
    【试剂】
    1.试剂厂商 Beckman Coulter。
    2.试剂1 己糖激酶＞4KU/L；葡萄糖-6-磷酸脱氢酶72.8KU/L； ADP2.0mmol/L； AMP 5.Ommol/L；磷酸肌酸30mmol/L； Mg2+10mmol/L； N-乙酰半胱氨酸20mmol/L； Tris缓冲液lOOmmol/L； EDTA 2.0mmol/L；二腺苷五磷酸（AP5A）0.01mmol/L。
    3.试剂2    NADP 2.0mmol/L；葡萄糖20mmol/L。
    4.试剂稳定性 未开瓶试剂2~8℃保存至试剂盒标示效期，开瓶后2~8℃可稳定30天。
    5.质控品 Bio-Rad公司Liquichek人血清不定值临床化学控制品，691及692两个水平。
    6.校准品 Beckman Coulter公司多项校准液（66300），靶值参见不同批号说明书。
    【参数设置】
    1.Sample vol：2.5μl   Dil vol：0μl   Pre-Dilution Rate：1
    2.Reagent 1 vol：100μl Dil vol：0μl
    3.Reagent 2 vol：25μl Dil vol：0μl
    4.Wavelength Pri：340nm Sec：660nm
    5.Point Fst：21 Lst：27
    6.Method：rate Reaction：（+）
    7.Linearity：15%
    8.Lag Time： NO
    9.Min OD：O Max OD：2
    10.Reagent OD Limit：First L-0.1   First H 0.3 Last L-0.1 Last H 0.3
    11.Dynamic range：10~2000
    12.Cal type：AB
    13.Correlation factor：See updated information on parameters
    【项目校准】
    1.更换试剂批号后，应校准。
    2.维护保养后如更换光源、清洗比色杯、清洁光路及仪器后光电校正、更换管路等应校准。
    3.质控失控后，在进行其他相应处理后，质控结果仍不满意的，应重新校准。
    【性能参数】
    1.精密度

质控
批内
总
浓度（U/L）
SD（U/L）
CV%
SD（U/L）
CV%
UN1557
241
3.18
1.32
6.10
2.54
UE1558
543
4.40
0.81
10.86
2.00

    2.检测范围 血清和血浆样本为10~2000U/L，当样本浓度超过检测范围上限时，可用0.9%生理盐水稀释2~20倍后重新测定，结果乘以稀释倍数。
    3.干扰 以下几种情况对检测值无显著影响（＜10%）
    胆红素    ≤684μmol/L
    血红蛋白≤lg/L
    甘油三酯≤11.3mmol/L（高脂样本超过反应允许吸光度时，结果将标记@，
    这时应15 000转高速离心15分钟后，取下层清亮液体测定。）
    检测系统2：Beckman Coulter UniCel
    【方法与原理】
    1.方法 IFCC推荐的酶法、速率法。
    2.原理
   
    反应中NADPH在340nm处吸光度变化的速率与样品中的肌酸激酶的活性成正比。
    【仪器】
    Beckman Coulter UniCel iclass系列生化免疫分析仪。
    【试剂】
    1.试剂厂商 Beckman Coulter。
    2.试剂内容物 每套试剂包括两个肌酸激酶试剂盒（2×400人份和2瓶A试剂），货号476836。成分：磷酸肌酸53 mmol/L，葡萄糖18mmol/L，ADP2.9mmol/L，氧化型β-烟酰胺腺嘌呤二核苷酸2.4mmol/L，己糖激酶＞11kIU/L，葡萄糖-6-磷酸脱氢酶＞3.8kIU/L，含有优化反应体系的非反应性化学成分。
    3.试剂的贮存及稳定性 2~8℃密封贮存至效期。开瓶后稳定30天（在效期内）。不可冻存。
    4.试剂准备 将CK瓶（A试剂）中的全部试剂转移至最大的试剂瓶（A瓶）中。轻轻颠倒充分混匀。
    5.质控品 Bio-Rad公司Liquichek人血清不定值临床化学控制品，691和692两个水平。
    6.校准品 无。
    【参数设置】
    1.标本量：13μl
    2.试剂量：总260μl（试剂A 238μl，试剂B 22μl）
    3.测定方式：RATE-1
    4.波长：340nm
    5.测试温度：37℃
    6.测试时间：共240秒，读点时间180~240秒
    【项目校准】
    无须校准。
    【性能参数】
    1.精密度

质控
批内
总
浓度（U/L）
SD（U/L）
CV%
SD（U/L）
CV%
水平1
151
2.20
1.5
2.60
1.7
水平2
477
7.90
1.7
10.20
2.1

    2.检测范围 血清和血浆标本为5~1200U/L，当样品中CK的含量超出系统的测试线性范围，可用生理盐水（或试剂级别的水）稀释3~5倍后重测定。将测试结果乘以稀释倍数，就得到原始样品中CK的含量。
    3.干扰物质 以下几种情况对检测值无显著影响（＜7%）：胆红素≤513）μmol/L，甘油三酯≤5.65mmol/L，腺苷酸激酶≤100U/L。溶血会造成结果假性升高，故不能使用溶血标本；肉眼脂血标本应15 000转高速离心15分钟后，取下层清亮液体测定。
    检测系统3：Siemens Dimension
    【方法与原理】
    1.方法 IFCC推荐的酶法、速率法。
    2.原理
   
    上述反应中NADPH在340nm处吸光度变化的速率与CK活性成正比。
    【仪器】
    Siemens Dimension系列自动生化分析仪。
    【试剂】
    1.试剂厂商 Siemens。
    2.试剂船1~6孔为4500U/L己糖激酶（反应体系浓度，下同）；2800U/LG-6-PDH，1.88mmol/L ADP，18.Immol/L磷酸肌酸，11.65mmol/L葡萄糖，2.88mmol/L NADP及缓冲液，AK腺苷酸激酶抑制剂，活化剂。
    3.试剂稳定性  未开封试剂盒2~8℃保存可稳定至效期；在仪器中，未打孔或未水化试剂稳定30天，打孔后稳定5天。
    4.质控品 Bio-Rad公司Liquichek人血清不定值临床化学控制品，691及692两个水平。
    5.校准验证用参考物质 Siemens CK Verifier（Cat.No.DC26），靶值参见不同批号说明书。
    【参数设置】
    1.Sample vol：14μl
    2.Reagent 1 vol：95μl    Dil vol：255μl
    3.Wavelength Pri：340nm Sec：405nm
    4.Method：rate Reaction：（+）
    5.Dynamic range：0~800
    【项目校准】
    1.定期校准：3个月。
    2.更换试剂批号后需校准，Verify方式。
    3.维护保养如更换光源、清洗比色杯、清洁光路、更换管路等之后需校准，Verify方式。
    【性能参数】
    1.精密度

    浓度（U/L）
批内
总
SD（U/L）
CV%
SD（U/L）
CV%
水平1
93
1. 80
1.9
2.65
2.9
水平2
661
2.95
0.5
18.0
2.7

    2.检测范围 0~800U/L。若样品中CK浓度大于800U/L，需用生理盐水稀释2~10倍后检测，结果乘以稀释倍数。
    3.干扰 以下几种情况对检测值无显著影响（＜10%）
    胆红素    ≤342μmol/L
    血红蛋白 ≤2.5g/L
    甘油三酯≤6.86mmol/L（高脂样本超过反应允许吸光度，仪器报警“ab-
    normal reaction”，这时应15 000转高速离心15分钟后，取下层
    清亮液体测定。）
    【参考范围】
    本实验室：18~198U/L。


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