呼吸衰竭，持续发热和肺泡灌洗液CMV阳性：真实的结果，还是并无关系？

Rita Pechulis MD & Samuel Krachman DO

Temple University

上期问题答案

问题1：此患者支气管灌洗液中针对CMV的最佳检测方法是？

1. CMV培养

2. 快速离心分离病毒(rapid shell vial assay)

3. 抗原血症检测

4. 血清学检查(IgG, IgM滴度)

5. PCR

答案：2. 快速离心分离病毒

这例患者CMV快速离心分离病毒结果为阳性。这种检验方法可用于多种临床标本，如尿液、血液和支气管灌洗液。进行检测时，需要对标本进行离心，以增加病毒吸附；然后单层细胞暴露于MIEp72抗原的特异性单克隆荧光抗体。如果有抗体结合即表明在细胞内有CMV早期复制，一般在24小时内就可以获得结果。

快速离心分离病毒的主要局限性在于敏感性较低。采用CMV培养作为金标准，快速离心分离病毒的敏感性69%，特异性96%[1]。然而，重要的是了解标本中存在CMV不一定提示存在活动性感染；诊断CMV感染必须结合临床表现、体格检查和病毒检测进行综合考虑。

CMV培养很少用于诊断活动性感染。CMV生长缓慢，需要1-6周才可引起明显的细胞病变。而且，即使存在CMV病毒血症，也不能确定存在活动性感染，这是因为在原发感染后，无症状的病毒脱落(shedding)仍可持续数月。由于存在上述局限性，因而很少进行CMV培养。但是，CMV培养可用于确定病毒耐药情况。

PP65是CMV的一种结构性蛋白，抗原血症检测能够定量检测PP65阳性的白细胞数目。阳性结果报告的方式为经过计数的细胞总数中染色阳性的细胞数。一项有关合并CMV感染的HIV阳性患者的研究表明，对于原发感染，抗原血症检测的敏感性97%，对复发感染的敏感性77%，总的敏感性91%，特异性73%[2]。阴性结果有助于排除原发性CMV感染，但在确定是否为活动性疾病时特异性仍显不足。

通过血清学检查诊断CMV感染包括检测CMV特异性IgM抗体，以及观察到相隔2-4周的标本中CMV特异性IgG滴度呈至少4倍升高。这种检测方法的局限性包括需要相隔2-4周采取血清标本。而且，IgM抗体可持续数月，因此造成急性感染诊断的困难。然而，抗体滴度能够确诊既往的CMV感染或暴露，可能有助于IgG抗体滴度阳性患者的预防。

还有多种分子检测方法，如定量和定性PCR、杂交捕获和核酸序列依赖性扩增法。定量和定性PCR能够检测全血、白细胞和血浆中的病毒DNA。对于AIDS患者，定性PCR诊断CMV感染的敏感性和特异性分别为89%和75%。定量PCR可用于监测病情变化，因为AIDS患者的病毒DNA高载量与临床症状相关。杂交捕获是应用一种针对CMV基因组17%核酸的RNA探针，以RNA：DNA杂交结合的方式使样本与抗体结合。这种检验方法可采用全血标本进行检测。核酸序列依赖性扩增法可检测到CMV感染的即刻早期基因UL123（IE1）和晚期基因（pp67）表达，可以在DNA的背景下对非结合的病毒mRNA进行扩增。这种检验方法也可用于全血标本的检测[3]。

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